[发明专利]吲哚咔唑类化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了三个吲哚咔唑类化合物及其制备方法和应用，所述的化合物为式I、式II、式III所示的结构。本发明提供的化合物可用于治疗与蛋白激酶抑制有关的急、慢性白血病、淋巴癌、乳腺癌、肺癌、胃癌等癌症，艾滋病，冠心病、糖尿病、老年痴呆症等疾病的药物。本发明还公开了抗肿瘤活性的化合物的制备方法，由海洋放线菌大米固体培养基发酵产生，经乙酸乙酯萃取后所得的发酵物，采用凝胶柱色谱和高效液相色谱分离纯化得到，易于操作和实施。

技术领域

本发明涉及海洋放线菌培养制备化合物技术领域，具体涉及三个吲哚咔唑类化合物及其制备方法和在制备具有抗肿瘤活性的药物中的应用。

背景技术

吲哚咔唑类化合物是一类来源于微生物发酵液中的生物碱，第一个分离得到的天然吲哚咔唑类化合物是1986年由链霉菌属AM-2282的培养液中分离的生物碱Staurosporine(STA)，研究发现该化合物具有抗菌、抗高血压、抗肿瘤和较强的蛋白激酶(PKC)抑制活性(IC₅₀＝2.7nM)。蛋白激酶C是一组磷脂依赖性Ca²⁺激活的蛋白丝氨酸M/苏氨酸激酶，是细胞生长因子信号传导过程中的一个重要成分，并且在肿瘤生长中起着重要作用。因此，针对蛋白激酶相关的癌症可作为有效的靶点治疗。但是研究发现星孢菌素特异选择性差，无法直接作为药物进入临床治疗，因此对于STA衍生物的挖掘开发不断深入。

目前从微生物中分离得到的STA衍生物，大部分具有较好的抗肿瘤活性。如唯一天然来源的UCN-01已完成用于治疗T-细胞淋巴瘤、黑素瘤、非小细胞肺癌Ⅱ期临床治疗。Midostaurin(PKC412)是人工半合成得到的STA类衍生物对PKC、VEGF、FLT3具有强抑制活性，除了能够抑制肿瘤细胞增殖还可以抑制肿瘤血管生成，该药物目前已进入急性髓性白血病Ⅱ期临床研究。K252a衍生物Lestaurtinib(CEP-701)，表现出抑制特异性神经营养因子Trk受体自身磷酸化、FLT3、RET酪氨酸激酶活性，2006年美国FDA批准作为治疗急性髓性白血病药物。除此之外，该类化合物还对细胞周期有关的激酶、细胞核拓扑异构酶具有较好活性，但值得注意的是，无论是人工合成还是结构修饰，除了UCN-01外都不是天然来源的代谢产物。

现已知，海洋放线菌代谢产物丰富，结构新颖，培养条件简单，因此从中得到结构新颖的STA衍生物，并应用于与蛋白激酶相关的癌症、结核病、疟疾、冠心病、病毒等治疗具有很好的发展前景。

发明内容

本发明提供了三个吲哚咔唑类化合物及其制备方法和在制备具有抗肿瘤活性的药物中的应用。该式I、式II、式Ⅲ结构的化合物是微生物代谢产物中结构特征新颖的化合物，本发明采用大米固体培养基培养发酵海洋放线菌，最终由发酵产物分离纯化获得式I、式II、式Ⅲ类结构的化合物。

吲哚咔唑类化合物，为式I、式II、式Ⅲ结构：

所述的吲哚咔唑类化合物的制备方法，由海洋放线菌固体发酵产生，经分离纯化得到，易于操作和实施。

所述的吲哚咔唑类化合物的制备方法，包括以下步骤：

1)将海洋放线菌接种于高氏一号液体培养基中，摇床培养，获得种子液；

2)将所得的种子液接种于大米固体培养基中，静置培养，萃取获得发酵产物；

3)将所得的发酵产物进行分离纯化后，获得式I、式II、式Ⅲ结构的化合物。

步骤1)中，所述的海洋放线菌，具体可采用市售产品，如采用中国工业微生物菌种保藏管理中心出售的链霉菌Streptomyces sp.CICC 11027，订购网址：http://www.china-cicc.org/。

所述的摇床培养的条件为：在26℃～30℃、130rpm～230rpm的摇床中培养2～4天，进一步优选，在28℃、180rpm的摇床中培养3天。