[发明专利]一种镇痛药配方及其提取方法和测试方法

权利要求书

1.一种镇痛药配方产品，其特征在于，包括：

从金不换提取的活性成分WVBF；

从雪上一枝蒿中提取的总生物碱CFA；

所述活性成分WVBF和总生物碱CFA按照预设的比例进行混合，得到镇痛药；其中，预设的比例具体为WVBF和CFA之间的质量比重为1:2或者1:5；

其中，在中枢镇痛方面1:2比例给药组有减毒存效作用，而1:5比例给药组有减毒增效作用；

其中，预设的比例具体通过以下的测试过程确定得到：

根据CFA与WVBF配比心血管毒性评价测试，确定能够缓解心血管毒性表型和/或不诱发明显的心血管毒性表型的一组或者多组配比；

根据CFA与WVBF配比心血管毒性评价测试得到的一组或者多组配比，用于CFA配伍WVBF的急性毒性测试，得到各组配比的LD₅₀值；

根据CFA与WVBF配比心血管毒性评价测试得到的一组或者多组配比，用于CFA配伍WVBF对热板法小鼠痛阈值测试，得到各自对应预设时段的镇痛率；

根据CFA与WVBF配比心血管毒性评价测试得到的一组或者多组配比，用于CFA配伍WVBF对冰醋酸所致扭体反应测试，得到各自对应预设时段的扭体抑制率；

WVBF的制备方法包括：

取金不换生药材，置于容器中，并向所述容器加入蒸馏水；

将所述容器放置在电热炉上加热至蒸馏水沸腾，加热3h后抽滤得到第一份提取液；

分别再加热2h后进行抽滤得到第二份提取液，以及再加热1h后进行抽滤得到第三份提取液；

合并所示第一份提取液、第二份提取液和第三份提取液，减压除去溶剂得干燥粉末；

雪上一枝蒿的总生物碱CFA的制备方法包括：

取雪上一枝蒿块根粉末，置于容器中，并加入95%乙醇；

水浴加热容器至沸腾，3h后抽滤；

分别再加热2h后进行抽滤，以及再加热1h后进行抽滤；

抽滤后合并提取液，减压回收溶剂得到浸膏；

浸膏加入浓度为2%的 H2SO4溶液进行混悬，石油醚脱脂，氨水调整pH到9，三氯甲烷萃取至有机相澄清，合并萃取液，浓缩干燥，得到总生物碱CFA。

2.根据权利要求1所述的镇痛药配方产品，其特征在于，在金不换生药材为500 g时，所述容器具体采用3 L容量的烧杯，则所述蒸馏水的剂量为2L。

3.根据权利要求1所述的镇痛药配方产品，其特征在于，在雪上一枝蒿块根粉末500 g时，将所述雪上一枝蒿块根粉末500 g，置于3 000 mL 圆底烧瓶中，加入2L浓度为95 %乙醇；

其中，所述浓度为2% 的H2SO4溶液的剂量为1 L。

4.根据权利要求1所述的镇痛药配方产品，其特征在于，所述CFA与WVBF配比心血管毒性评价测试，具体包括：

在饲养有斑马鱼的六孔板中分别水溶给予66.6μg/mL的CFA、及其与WVBF不同的配比：1:5、1:2、2:1和5:1浓度，设置溶剂对照组和正常对照组；

供试品处理斑马鱼4小时后，每个实验组随机选择10尾斑马鱼在显微镜下记录并统计斑马鱼心率，计算相对心率，并观察有无心律不齐；若发生心律不齐，则分别计数心房率和心室率；

供试品处理斑马鱼24小时后，每个实验组随机选择10尾斑马鱼，同样在显微镜下观察有无心包水肿、血流异常、血栓和/或出血，并统计其发生率；

其中，所述发生率大于第一预设阈值而小于第二预设阈值，则表明能够缓解心血管毒性表型；所述发生率小于第一预设阈值，则表明没有诱发明显的心血管毒性表型。