[发明专利]一种新型双重靶向抑制肿瘤细胞迁移与侵袭的介孔二氧化硅纳米给药系统及其制备方法

说明书

本发明提供一种新型双重靶向抑制肿瘤细胞迁移与侵袭的介孔二氧化硅纳米给药系统及其制备方法，该介孔二氧化硅纳米给药系统中以环五肽‑透明质酸作为靶向材料、以阿霉素作为模型药物、以介孔二氧化硅作为药物载体。制备方法包括：1)将1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)依次滴加到透明质酸钠水溶液中，活化1‑1.5h后加入环五肽ADH‑1，反应24～48h后，对反应液进行透析纯化后得到靶向材料环五肽‑透明质酸。2)将靶向材料溶于去离子水中，再加入EDC与NHS，活化后，加入氨基化介孔二氧化硅，反应液离心、洗涤、纯化、冷冻干燥得到产品。本发明能够提高对肿瘤细胞迁移与侵袭的抑制率；制备工艺简单，具有广阔应用前景。

技术领域

本发明属于药物制剂领域，提供了一种新型双重靶向抑制肿瘤细胞迁移与侵袭的介孔二氧化硅纳米给药系统。

技术背景

肿瘤转移是癌症成功治疗的主要障碍，超过90％的癌症患者死于肿瘤转移。因此，如何抑制肿瘤转移，尤其是抑制肿瘤的早期转移对于提高癌症患者的生存率至关重要。肿瘤的转移是一个多步骤、多阶段、多因素的复杂生物学过程。越来越多的证据表明，上皮间质转化(EMT)是许多肿瘤侵袭和转移早期的一个重要的过程，是肿瘤细胞转移中的关键步骤。原发肿瘤细胞发生EMT而获得运动和侵袭能力，从而使肿瘤细胞的侵袭与转移能力增强。因此，针对EMT的治疗能切实抑制肿瘤的侵袭和转移。

肿瘤细胞发生EMT时，会失去与基质膜之间的联系，细胞的形态和细胞分子标志物的表达会发生变化。其中，N-钙粘蛋白(N-cadherin)是肿瘤细胞发生 EMT时显著高表达的分子标志物，在肿瘤的早期侵袭与转移中发挥着至关重要的作用。研究表明，肿瘤细胞中N-cadherin表达的上调会促进其侵袭与转移。因此，下调或是抑制N-cadherin的表达，是抗肿瘤转移的一个很有潜力的治疗策略。环五肽ADH-1是一种N-cadherin的拮抗剂，能够选择性地结合并阻断 N-cadherin的功能，从而有效地抑制N-cadherin介导的肿瘤细胞的迁移与侵袭。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明提供一种新型双重靶向抑制肿瘤细胞迁移与侵袭的介孔二氧化硅纳米给药系统及其制备方法。

为了达到上述目的，本发明的技术方案为：

一种新型双重靶向抑制肿瘤细胞迁移与侵袭的介孔二氧化硅纳米给药系统，该介孔二氧化硅纳米给药系统中环五肽-透明质酸ADH-1-HA作为靶向材料、阿霉素作为模型药物、氨基化的介孔二氧化硅作为载体。靶向材料中的环五肽 ADH-1作为发生EMT的肿瘤细胞表面N-cadherin的靶向抑制剂；靶向材料中的透明质酸(HA)作为主动靶向递送的靶头分子，利用其与肿瘤细胞表面CD44 受体的特异性结合，实现对肿瘤细胞的靶向识别，同时HA还作为ADH-1与氨基化的介孔二氧化硅之间的偶联分子；采用氨基化的介孔二氧化硅作为药物载体，利用其有序的介孔结构、大的比表面积、良好的生物相容性及表面易于修饰等特点，实现对药物DOX的高效包载及对自身的表面修饰；该新型双重靶向抑制肿瘤细胞迁移与侵袭的介孔二氧化硅纳米给药系统对发生EMT的肿瘤细胞具有主动靶向结合与靶向抑制能力，能够有效地抑制肿瘤细胞的迁移与侵袭。

上述双重靶向抑制肿瘤细胞迁移与侵袭的介孔二氧化硅纳米给药系统的制备方法：

第一步，合成靶向材料环五肽-透明质酸(ADH-1-HA)

1.1)将透明质酸钠溶于去离子水并置于茄型瓶中，室温下溶胀12～24h，得到透明质酸钠水溶液。所述的透明质酸钠水溶液的浓度为15～31mg/ml，透明质酸钠的分子量为37KDa。

1.2)将1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)依次滴加到透明质酸钠水溶液中，活化透明质酸钠中的羧基 1～1.5h，得到混合溶液。所述的EDC与NHS的摩尔比为1:1～0.5，透明质酸钠中的羧基与EDC的摩尔比为1:1～1.5。