[发明专利]一种新型半固体培养基及其应用

说明书

本发明公开了一种新型半固体培养基，其形成半固体的支撑物成分为结冷胶、卡拉胶、二价阳离子、镧系元素的金属离子混合物。在液体培养基中，加入以上品种的对应浓度的混合物，形成的半固体培养基具有表面平整光滑，凝胶强度大的特点。

技术领域

本发明涉及一种半固体培养基。

背景技术

培养基是微生物发酵过程或动植物细胞培养过程中供微生物或动、植物细胞生长、繁殖或累积代谢产物所必需的营养基质。培养基的成分包括:碳源、氮源、矿物质，以及其他必需物质，如某些生物自身不能合成的物质，如某些氨基酸、维生素或核苷酸等。此外，培养基中还常加入pH缓冲剂以维持稳定的pH。培养基按其物理形态又可分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基等。

半固体培养基是生物学和生物医药科研和生物工程生产实践中很常用的一类培养基，常常被应用于菌株的保存、菌株的筛选等方面。

传统的半固体培养基的应用为在营养物质的溶液中加入1％-2％的琼脂，加热后倒入模具中冷却，即可暂时储存待用。而传统的半固体培养基以琼脂作为支撑物，其形成的半固体的强度并不是非常牢固，容易破碎，在实际的应用中会带来操作上的不便。

应用于其它行业，如食品行业的一些凝胶如果胶、结冷胶、卡拉胶等也被陆续应用到半固体培养基上来，但总体效果在强度方面均不是很理想。而一些强度较大的凝胶(如聚丙烯酰胺凝胶)，强度很好，但是其表面凹凸不平，无法实现生物工程实验及生产过程的操作。

发明内容

针对传统的以琼脂及其它单品种凝胶作为支撑物的半固体培养基强度差的缺点，设计了本发明的技术方案。本技术方案克服了半固体培养基既要满足强度大，又要满足表面平整光滑的特点。本发明的具体实施方式为：

一种新型半固体培养基，其支撑物成分为结冷胶、卡拉胶及金属离子混合物。

进一步，所述的卡拉胶为iota型。

进一步，所述的金属离子为二价阳离子，镧系元素的金属离子。

所述的新型半固体培养基用于大肠埃希氏杆菌工程菌株的筛选，培养、保存。

本发明中新型半固体培养基强度指用两枚一元硬币(2005年版)相互重叠放置于半固体培养基表面24小时，不会产生压花或者压痕。

本发明中新型半固体培养基表面光滑平整指在加热的液体状态下倒入模具冷却后，形成的半固体表面在同一水平面上没有高度差。

本发明中结冷胶、iota型卡拉胶的配比为1:1，且单组份质量百分比为0-2％，更优为0.5％-1.0％。

本发明中二价阳离子的总摩尔浓度不超过50mM，更优的为10mM-25mM。

本发明中镧系元素的金属离子的总摩尔浓度不超过3mM，更优的为1mM-2mM。

本发明与传统技术相比，突出的优点在于：利用不同凝胶的合理配比，加入凝胶成型必须的二价阳离子，尤其在额外加入镧系元素的金属离子后，凝胶强度大大增强，且维持了凝胶冷却成型后的表面光滑平整，为实验操作人员带来极大的便利。

具体实施方式

实施例1

在普通液体LB培养基中加入1.5％的琼脂，高温熔化后倒入平皿冷却，凝胶澄清透明，表面平整光滑，取20g标准砝码放置于表面，24小时后观察，产生压花或压痕。

实施例2

在普通液体LB培养基中加入0.75％的结冷胶，终浓度10mM的二价镁离子，0.75％的iota卡拉胶，终浓度10mM的二价钙离子，高温熔化后倒入平皿冷却，凝胶澄清透明，表面平整光滑，取20g标准砝码放置于表面，24小时后观察，产生压花或压痕。