[发明专利]一种膀胱癌筛选检测试剂盒

说明书

本发明主要属于肿瘤分子生物学领域，具体涉及一种膀胱癌筛选检测试剂盒。所述试剂盒用于检测膀胱癌相关基因的cDNA的寡核苷酸；所述试剂盒包括特异性引物对，所述特异性引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物序列如SEQ ID No.2所示。所述试剂盒能够检测膀胱癌相关基因的cDNA的寡核苷酸，KMT1A作为膀胱癌的一个新的标志物，可用于膀胱癌的辅助诊断。

技术领域

本发明主要属于肿瘤分子生物学领域，具体涉及一种膀胱癌筛选检测试剂盒。

背景技术

膀胱癌是泌尿系统肿瘤中最常见的恶性肿瘤。在我国，膀胱癌的发病率为6.61/10万，在泌尿系统肿瘤中排第一位。膀胱癌发生的危险因素主要包括吸烟、芳香胺类致癌物、砒霜、膀胱的慢性感染、电离辐射和非那西汀类药物的滥用。根据病理特征，膀胱癌在临床上分为浅表型(70％)和浸润型(30％)两大类。预后较差和极易复发是膀胱癌的最大特点，有效的治疗很大程度上依赖于对膀胱癌的早期发现和治疗。

目前，膀胱癌诊断主要依赖于膀胱镜检查和尿细胞学检查。前者为诊断膀胱癌的金标准，价格比较昂贵，并为侵入性的检查，对于需要长期随访的患者是一种较大的负担，且患者依从性差，不宜作为常规检查；后者虽然特异度高且无创，但对低度表浅性的肿瘤敏感性低，容易产生假阴性的结果。因此，寻找敏感度及特异度高的膀胱癌肿瘤标志物作为膀胱癌的早期诊断、监测以及预后评估受到越来越多的关注。相对传统检查手段和影像学检查技术，肿瘤标志物最大的优点在于简单快捷，免除患者额外检查的痛苦。通过简单的采血或尿液收集即可获取标本进行检测，操作方便，且可应用于伴有重大脏器功能障碍无法行内镜检查或植入心脏起搏器不能接受强辐射影像学检查的患者。靶向诊断技术的优势在于发现早期形态学变化不明显的肿瘤细胞和组织，可应用于膀胱癌筛查或预后监测，并在一定程度上可以起到辅助对膀胱癌进行分级、分期的工作。

目前临床上正在使用的膀胱癌相关的肿瘤标志物包括核基质蛋白22(NMP22)和膀胱肿瘤相关抗原(BTA)等，但尚无单一标志物可诊断膀胱癌，且不能替代膀胱镜检查。

NMP22是一种细胞核内有丝分裂蛋白，其在细胞凋亡后被释放出来，以可溶性复合物或片段的形式存在于人的尿液中，其在膀胱癌患者尿液中浓度升高了25倍左右，可采用酶联免疫吸附试验可以检测其浓度，是NMP22作为临床诊断膀胱移行细胞癌的依据。有学者对1331例临床患者的尿液标本的NMP22进行了检测，发现其较传统尿细胞学筛查具有更高的膀胱癌检出率。用于诊断时，NMP22对膀胱癌的敏感度远高于尿脱落细胞学(56％vs.16％)，但NMP-22的特异度不及尿脱落细胞学(86％vs.99％)；用于复发监测时，NMP22对膀胱癌的敏感度和特异度分别为50％和87％。美国FDA已批准将NMP22应用于临床膀胱癌的检测。但NMP22在其他泌尿系疾病，诸如血尿、脓尿、尿路结石和膀胱炎患者尿液中也有升高，会影响到其检测膀胱癌的特异性。

BTA又称人补体因子H相关蛋白质，是在膀胱肿瘤生长过程中所释放的一种由16～165kd特异性多肽组成的高分子复合物，其结构与人补体因子H类似，可通过干扰补体途径使得膀胱肿瘤细胞逃逸宿主免疫系统的攻击，获得选择性生长优势。尿液BTA水平升高对膀胱癌有一定的早期诊断价值，Miyake等收集了126例(64例膀胱癌组、62例对照组)血尿患者的尿液标本，利用BTA检测试剂盒(BTA和)对尿液标本中的BTA水平进行了检测，结果显示，膀胱癌组阳性率为72％，但对照组亦有47％的患者为阳性结果，BTA对膀胱癌的敏感性和特异性分别为72％和53％，由此认为BTA检测有助于膀胱癌的早期诊断，但其易受血尿影响而出现假阳性结果。

因此，亟需开发和鉴定高特异性和高灵敏性的标志物用于膀胱癌的诊断。

发明内容

针对上述技术问题，本发明提供一种膀胱癌筛选检测试剂盒，所述试剂盒能够检测膀胱癌相关基因的cDNA的寡核苷酸，KMT1A作为膀胱癌的一个新的标志物，可用于膀胱癌的辅助诊断。