[发明专利]一种用于脂肪性肝炎检测的靶标志物GP73及检测应用方法

说明书

本发明提供了一种用于在脂肪肝人群中诊断鉴别单纯性脂肪变和脂肪性肝炎的新血清学靶标志物GP73及其检测应用方法。血清学靶标志物GP73及其应用可代替金标准肝穿刺鉴别诊断脂肪肝人群中的单纯性脂肪变和脂肪性肝炎，降低患者检测痛苦，对于临床鉴别诊断脂肪肝人群中的单纯性脂肪变和脂肪性肝炎，辅助单纯性脂肪变和脂肪性肝炎的治疗具有极高的临床应用价值。

技术领域

本发明涉及一种体外检测脂肪性肝炎的新标志物及检测方法，属于生物技术和体外诊断的细分领域。

背景技术

脂肪肝是指由于各种原因引起的肝细胞内脂肪异常堆积过多的病变。正常人肝组织中含有少量的脂肪，其重量约为肝重量的4％～5％，若脂肪量超过5％为轻度脂肪肝，超过10％为中度脂肪肝，超过25％为重度脂肪肝。脂肪肝是目前最常见的慢性肝脏疾病之一，在发达国家和部分发展中国家发病率达到30％以上，已成为一个重要的公共健康问题，严重威胁人民健康。脂肪肝包括单纯性脂肪变、脂肪性肝炎、肝纤维化、肝硬化等主要病理阶段；脂肪肝中的单纯性脂肪变是良性的，通过饮食、运动调控等可以逆转，不需要经过特异性治疗；而脂肪性肝炎如不及时治疗，将随着疾病的进展将进一步向肝纤、肝硬化、肝癌发展，报道显示脂肪性肝炎转化为肝纤肝硬化，直至肝癌的发病率与病毒性肝炎的发病率相当。脂肪性肝炎严重威胁人民的健康，目前，脂肪肝主要通过B超、CT、MRI等影像学手段检测，但是影像学检测无法区分单纯性脂肪变和脂肪性肝炎，脂肪性肝炎的确诊仍依赖于肝穿刺检测，肝穿刺检测会给患者带来较大的身体和心里负担，不利于脂肪性肝炎的诊断确诊和日常检测。

高尔基体蛋白73(如无特殊说明，以下均简称GP73)是高尔基体糖蛋白， 2000年首先由Kladney等在研究成人巨细胞肝炎病原学时发现的一种新的跨膜糖蛋白，又称II型高尔基体膜蛋白(Golph 2)和高尔基体膜蛋白I(Golm 1)，相对分子量为73000kDa。GP73在正常的肝细胞内不表达或少量表达，近几年的研究发现，GP73在肝纤、肝硬化及肝癌等多种肝脏疾病中呈高表达状态，并可分泌进入血清，肝癌患者中的GP73升高最为明显，是肝癌早期诊断的优选标志物之一，其敏感性和特异性均优于AFP。

中国专利公布CN 101735319 A(北京热景生物技术股份有限公司,专利名称“一种抗GP73蛋白的单克隆抗体、其制备方法和应用”)，公开了一种抗高尔基蛋白GP73的单克隆抗体，一种应用GP73的酶联免疫定量检测试剂盒和一种快速诊断试剂盒，并公开了正常人与肝病患者的GP73含量的临界值为 40ng/ml，良性肝病患者与恶性肝病患者的GP73含量的临界值为100ng/ml。

中国专利公布CN 101407544 A(专利名称：“抗高尔基体蛋白单克隆抗体及应用”)公开了一种抗GP73单克隆抗体及应用该单克隆体的肝癌检测的酶免试剂和免疫沉淀、免疫印迹、免疫组化等方面的应用。

中国专利公布CN 104215761 A(专利名称：“检测血清中抗GP73抗体的试剂盒”)公开了一种检测血清中抗GP73抗体检测的酶联免疫试剂盒，主要用于肝癌检测。

近年来，GP73及其相关应用研究主要集中在肝癌早期诊断领域，GP73 相关专利申请也主要集中在应用GP73及其抗体进行肝癌检测的体外诊断试剂盒领域，未见GP73用于脂肪肝人群中诊断鉴别单纯性脂肪变和脂肪性肝炎的研究及应用的报道及相关专利申请。我们经过大量临床样本研究分析，充分证明GP73是在脂肪肝人群中诊断鉴别单纯性脂肪变和脂肪性肝炎的优秀血清学标志物，对于脂肪性肝炎人群的诊断和鉴别都有着重要的临床应用价值。

发明内容

目前临床上应用肝穿刺来诊断鉴别脂肪肝人群中的单纯性脂肪变和脂肪性肝炎，给患者带来巨大痛苦，为了解决现有影像学检测技术和血清学检测技术无法在脂肪肝人群中诊断鉴别单纯性脂肪变和脂肪性肝炎的不足，本发明提供了一种在脂肪肝人群中诊断鉴别单纯性脂肪变和脂肪性肝炎的新血清学靶标志物GP73，并进一步提供了在脂肪肝人群中诊断鉴别单纯性脂肪变和脂肪性肝炎的检测GP73的检测试剂盒，检测方法及其判定标准。