[发明专利]一种调控酪酸菌发酵效率的方法有效
申请号: | 201710442643.5 | 申请日: | 2017-06-13 |
公开(公告)号: | CN107118994B | 公开(公告)日: | 2021-02-19 |
发明(设计)人: | 李盘欣;王志;夏会丽;许文亮;黄亚男;史咏华;彭丽;王培英 | 申请(专利权)人: | 河南省南街村(集团)有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/38;C12R1/145 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 俞晓明 |
地址: | 462600*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 调控 酪酸 发酵 效率 方法 | ||
1.一种调控酪酸菌发酵效率的方法,包括制备培养基阶段、制备酪酸菌种子液阶段和发酵培养阶段,其特征在于,
所述制备酪酸菌种子液阶段的步骤为:
按无菌、无氧操作要求,从酪酸菌种冻干管接出细胞至新制备的厌氧管斜面;37℃培养12 h后,按无菌、无氧操作要求,加入10 mL无菌、无氧水,得到厌氧管种子液;
准备120 mL的厌氧瓶,每个厌氧瓶内装入60 mL种子液培养基,将厌氧管种子液接入厌氧瓶中,其中,厌氧管种子液与厌氧瓶内种子液培养基的体积比例为1:100,37℃、100 r/min摇床培养12 h,得到厌氧瓶种子液;按无菌、无氧操作要求,将所有的厌氧瓶种子液进行合瓶操作,得到酪酸菌种子液;
所述发酵培养阶段的步骤为:
装有培养基的发酵罐灭菌、氮气置换除氧后,将酪酸菌种子液火焰保护接入发酵罐内,其中,酪酸菌种子液与发酵罐内种子液培养基的体积比例为1:100;
按如下条件进行发酵培养:发酵温度为37℃;发酵罐搅拌转速为100 r/min;在酪酸菌发酵2 h之内,采用通氮气进行厌氧保护,氮气流量控制为0.1 vvm;罐压控制为0.03-0.04MPa;酪酸菌发酵2 h后停止通氮气;酪酸菌发酵培养12-14 h后放罐;
在酪酸菌发酵时2 h之内流加无菌、无氧的浓度为10 g/L的甲酸钠溶液,流加速度为188-540 mL/h,直至发酵液中甲酸钠的终浓度为0.0625-0.18 g/L;
所述酪酸菌为丁酸梭状芽孢杆菌HBUT-01,在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO:M2016628,保藏日期为2016年11月9日。
2. 根据权利要求1所述的调控酪酸菌发酵效率的方法,其特征在于,所述发酵培养阶段中,在酪酸菌发酵2 h之内流加无菌、无氧的浓度为10 g/L的甲酸钠溶液,直至发酵液中甲酸钠的终浓度为0.125 g/L。
3.根据权利要求1所述的调控酪酸菌发酵效率的方法,其特征在于,发酵培养阶段中,采用的发酵罐为100 L的发酵罐,装料体积为60 L。
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