[发明专利]利用BCS1L基因和向导RNA/CAS核酸内切酶体系改良植物农艺性状的方法在审
| 申请号: | 201710441868.9 | 申请日: | 2017-06-13 |
| 公开(公告)号: | CN109082436A | 公开(公告)日: | 2018-12-25 |
| 发明(设计)人: | 吕贵华;毛冠凡;石彦龙;王昌贵;王国奎 | 申请(专利权)人: | 未名生物农业集团有限公司;先锋海外公司 |
| 主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82 |
| 代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人: | 王健;林晓红 |
| 地址: | 100085 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 农艺性状 植物或植物细胞 改良植物 基因组 非生物胁迫耐受性 核酸内切酶 核苷酸序列 细胞基因组 靶位点 靶序列 抗旱性 内切酶 修饰 增高 改良 基因 期望 | ||
1.一种植物,所述植物的内源BCS1L多肽的表达水平或活性与对照植物的野生型BCS1L多肽的表达水平或活性相比是降低的;与对照植物相比,所述植物表现以下至少一种表型:增加产量、增加非生物胁迫耐受性和增加生物量;所述内源BCS1L多肽的表达或活性通过引入基因组修饰而降低。
2.权利要求1所述的一种植物,其中所述方法引入的基因组修饰包括向内源BCS1L基因和其启动子所在的基因组区域(a)引入一段DNA片段或删除一段DNA片段或替换一段DNA片段,或(b)引入一个或多个核苷酸改变,其中所述修饰降低内源BCS1L多肽的表达水平或活性。
3.一种包含突变的BCS1L基因的植物,其中,与对照植物相比,所述植物中BCS1L基因的表达水平或活性是降低的;且与对照植物相比,所述植物表现以下至少一种表型:增加产量、增加非生物胁迫耐受性和增加生物量。
4.一种包含突变的BCS1L基因的植物,其中,与对照植物相比,所述植物的BCS1L多肽的活性是降低的或消除的;且与对照植物相比,所述植物表现以下至少一种表型:增加产量、增加非生物胁迫耐受性和增加生物量。
5.如权利要求3或4所述的植物,所述突变的BCS1L基因的核苷酸序列与SEQ ID NO:6或7的序列一致性至少为95%。
6.一种包含突变的BCS1L基因启动子的植物,其中,与对照植物相比,所述植物的BCS1L多肽的活性是降低的或消除的;且与对照植物相比,所述植物表现以下至少一种表型:增加产量、增加非生物胁迫耐受性和增加生物量。
7.如权利要求6所述的植物,所述突变的BCS1L基因启动子的核苷酸序列与SEQ ID NO:9的序列一致性至少为90%。
8.如权利要求1至7任意一项所述的植物,其中所述植物表现增加的非生物胁迫耐受性,所述非生物胁迫耐受性是耐旱性。
9.如权利要求1至8任意一项所述的植物,其中所述植物选自水稻、玉米、大豆、向日葵、高粱、油菜、小麦、苜蓿、棉花、大麦、粟、甘蔗或柳枝稷。
10.一种方法,为与对照植物的野生型BCS1L表达水平或活性相比,通过引入基因组修饰降低植物内源BCS1L多肽的表达水平或活性方法;且与对照植物相比,所述植物表现以下至少一种表型:增加的耐旱性、增加产量、增加非生物胁迫耐受性和增加生物量;所述方法包括以下步骤:在内源BCS1L基因和其启动子所在的基因组区域(i)引入一段DNA片段,删除一段DNA片段或替换一段DNA片段,或(ii)引入一个或多个核苷酸改变,其中所述改变能有效降低内源BCS1L多肽的表达水平或活性。
11.如权利要求10所述的方法,其中所述改变通过锌指核酸酶,转录激活样效应因子核酸酶(TALENs),CRISPR-Cas/Cpf1或归巢核酸内切酶(Meganucleases)引入。
12.如权利要求11所述的方法,其中所述改变通过CRISPR-Cas体系引入。
13.一种增加植物耐旱性的方法,包括:
(a)将可降低内源BCS1L多肽的表达水平或活性的构建体引入一个可再生植物细胞;
(b)由步骤(a)所述再生植物细胞获得一个修饰的植物;和
(c)获得由步骤(b)的修饰植物的子代植物,其中所述子代植物与对照植物相比具有增加的耐旱性。
14.如权利要求13所述的方法,其中所述构建体包括至少一个异源调控序列和与其可操作连接的gRNA,所述gRNA靶向内源BCS1L基因或其启动子。
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