[发明专利]硅柱快速再生方法

说明书

本发明属于生物技术与方法领域，具体为硅柱快速再生方法，取硅柱加蒸馏水，进行离心分离，再加入硅柱再生液，静置3分钟进行离心分离；硅柱再生液为磷酸溶液；重复五次，用L蒸馏水清洗后进行离心分离，除尽硅柱中残留水分，再去离子水清洗。本发明提供的硅柱快速再生方法，针对PCR清洁试剂盒中或琼脂糖胶抽提试剂盒中的硅柱进行再生和利用，可以为实验室节约资金，为社会节约资源，是更加环保的使用硅柱的方法。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体为硅柱快速再生方法。

背景技术

传统的分子克隆方法费时费力；因此，许多实验方法或技术被商业试剂盒取代，如1)用于PCR产物(或DNA)纯化的PCR清洁试剂盒(PCR即聚合酶链式反应是基因或DNA扩增的主要手段)，2)用于DNA酶切产物纯化的琼脂糖胶抽提试剂盒和3)质粒提取试剂盒。利用这些试剂盒加快了分子克隆的进程和研究的效率。由于试剂盒相对昂贵而且产品的设计主要是一次性使用，试剂盒的使用也耗费了许多实验室的财力。

上述试剂盒主要由硅柱和实验试剂组成，其核心材料是硅柱。一次性使用的试剂盒，一方面，造成大量的垃圾和环境问题，另一方面，也造成资金和资源的浪费。

发明内容

针对上述技术问题，本发明提供一种使硅柱快速再生的方法，并对再生的硅柱进行了功能鉴定。

具体技术方案为：

硅柱快速再生方法，包括以下过程：

(1)取硅柱置于收集管中，加0.75mL蒸馏水，进行离心分离，弃去收集管中废液；

(2)向硅柱中加入硅柱再生液，静置3分钟进行离心分离，弃去收集管中废液；所述的硅柱再生液为磷酸溶液；

(3)重复步骤(2)五次；

(4)用0.75mL蒸馏水，离心分离、清洗硅柱，弃去收集管中废液；

(5)将硅柱移至无菌离心管中，离心1分钟，除尽硅柱中残留水分即可得到快速再生的硅柱；

以上所述的离心分离过程为采用台式离心机中，在室温下，以12000rpm速度离心1分钟。

所述的磷酸溶液浓度为1mol/L。

本发明提供的硅柱快速再生方法针对PCR清洁试剂盒中或琼脂糖胶抽提试剂盒中的硅柱进行再生和利用，可以为实验室节约资金，为社会节约资源，是更加环保的使用硅柱的方法。

附图说明

图1为实施例中的标准曲线；

图2为实施例中不同浓度的磷酸对硅柱DNA污染清除效果分析；

图3为实施例中再生硅柱与未使用过的硅柱对DNA纯化效果比较分析；

图4为实施例中再生硅柱从琼脂糖中回收、纯化DNA效果分析；

图5为实施例中再生硅柱多次连续使用对DNA纯化效果分析；

图6为实施例中再生硅柱与原始柱对Tbox5基因克隆比较分析。

硅柱再生具体实施方式

以下结合多个实验和实施例说明本发明的具体技术方案。

实施步骤一、标准曲线的建立