[发明专利]基于微粒子化学发光免疫分析的sST2检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及化学发光检测试剂盒，尤其是涉及基于微粒子化学发光免疫分析的sST2检测试剂盒。

背景技术

心力衰竭是指任何心脏结构或功能异常导致心脏充盈或射血能力受损的一组复杂临床综合征，是各种心脏疾病的终末阶段。目前全球有近2300万人患有心力衰竭，其中美国有近600万人患有心力衰竭，而中国也有近500万人患有心力衰竭，占全球总人数的1/4左右。NT-proBNP是目前公认的诊断心力衰竭的有效指标。因灵敏性高、与心衰程度正相关、并能够预测心衰的治疗效果而广泛应用。但NT-proBNP作为心衰的标志物存在如下不足：NT-proBNP会随着年龄增长而增高，且女性高于男性；急性冠脉综合征、肺部疾病、慢性肾功能不全等其他疾病也能导致NT-proBNP升高。生长刺激表达基因2蛋白，即ST2，又被称为IL1RL1或IL-1R，是白介素1受体家族成员之一，有跨膜型(ST2L)和可溶性(sST2)两种形式。研究表明，心力衰竭患者sST2水平显著升高，并且与NT-proBNP相比，sST2的诊断价值不受肾功能的影响，sST2的浓度水平不会随着肾功能不全的严重程度而显著升高([1]Bayes-Genis A,Zamora E,de Antonio M,et al.Soluble ST2 serum concentration and renal function in heart failure[J].J Card Fail,2013,19:768–75.)。《2014中国心力衰竭诊断和治疗指南》指出，sST2能够为心衰患者的危险分层提供额外的信息，可用于评价心衰的预后([2]中华医学会心血管病分会,《中华心血管病杂志》编辑委员会.中国心力衰竭诊断和治疗指南2014[J].中华心血管病杂志,2014,42(2):98-121.)；《2013美国心脏病学会心力衰竭诊断和治疗指南》指出，sST2能够提示心衰患者的危险分层，并对利钠肽的预后评估作用有一定的补充价值([3]Yancy CW,Jessup M,Bozkurt B,et al.2013 ACCF/AHA guideline for the management of heart failure:a report of the American College of Cardiology Foundation/American Heart Association task force on practice guidelines 2013[J].J Am Coll Cardio,2013,62(16):147-239.)。sST2已经成为心衰最具潜力的生物标志物之一，对于心衰的诊断和预后有着重要的意义。

目前，国内外检测sST2的方法主要是酶联免疫试验(ELISA)([4]Thomas Mueller,Matthias Zimmermann,Benjamin Dieplinger,et al.Comparison of plasma concentrations of soluble ST2 measured by three different commercially available assays:The MBL ST2 assay,the Presage ST2 assay,and the R&D ST2 assay[J].Clinica Chimica Acta,2012,413:1493-94.)，该方法线性范围窄，灵敏度低，稳定性差，操作繁琐，且自动化程度低。这些缺点限制了sST2检测的推广应用，使其无法广泛地应用于临床诊断与科研工作。

微粒子化学发光免疫分析技术(Chemiluminescence Immunoassay，CLIA)是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术，是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术，具有操作简单、灵敏度高、线性范围宽、结果稳定、安全性好、便于自动化、产品有效期长、对环境无污染、对人体无毒无害等优点，是目前体外诊断试剂检测方法中的佼佼者，在技术上具有明显的优势。目前微粒子化学发光免疫分析法已广泛应用于乙肝两对半(CN 102072957)、性激素(CN 103954779)、肿瘤标志物等各种抗原的检测，取得了良好的社会效益，但国内外尚未见有此类sST2检测试剂盒问世，本项目的研发将填补这一空白，其市场应用前景广阔。

发明内容