[发明专利]一种用于红富士苹果授粉花粉悬浮液的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于红富士苹果授粉花粉悬浮液的制备方法，属于果树授粉技术领域。

背景技术

苹果大多自花不育，需异花授粉，果实由子房和花托发育而成。植物自交不亲和性是被子植物中普遍存在的限制自花受精的机制，它阻止基因型相同的花粉管在雌蕊中正常生长，完成受精。该反应涉及到70多个科，250多个属。自交不亲和的发生防止了近亲繁殖、促进异花授粉受精，有利于物种多样性。根据其控制因子的不同，自交不亲和的类型可分为孢子体型和配子体型。配子体自交不亲和性是指在花粉和雌蕊的相互作用过程中，花粉的行为决定于花粉粒内壁蛋白的性质，也就是由花粉粒本身的单倍体基因型决定的，薇科多种果树如梨、苹果、甜樱桃、杏、果梅、李和扁桃等表现出配子体型自交不亲和性。自交不亲和现象在一定程度上推动了物种的进化，但是在经济作物的生产中比如苹果生产中也造成了一定的障碍。由于这些果树自花授粉不能结实，在生产上必须配置授粉品种，或进行人工辅助授粉才能保证座果，从而增加了生产成本。

目前，克服自交不亲和的方法一般可归为生物学方法、物理学方法和化学处理法三大类。其中化学处理法一般是在苹果花期喷施3～10%的NaCl溶液，NaCl的浓度与自交不亲和的程度有关，但是这会导致花粉会出现不同程度的皱缩而无法萌发，影响花粉的活性，使得苹果的结果率会非常低，严重影响果园的产量和效益。因此，迫切寻找一种不影响花粉的活性，提高花粉的座果率的授粉花粉悬浮液。

发明内容

本发明所要解决的技术问题：针对传统的苹果授粉方法影响花粉的活性，导致花粉出现不同程度的皱缩而无法萌发，降低了苹果的座果率，严重影响果园的产量和效益的问题，提供了一种用于红富士苹果授粉花粉悬浮液的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

一种用于红富士苹果授粉花粉悬浮液的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：

（1）在珊夏苹果树处于花期时，选取花朵和花蕾并采摘，在避光环境中收集珊夏苹果花粉，将珊夏苹果花粉置于白炽灯下干燥，将干燥后花粉过筛除杂，收集除杂后的花粉，并装入无菌离心管中，置于4℃的环境下避光保存；

（2）按重量份数计，分别称取50～60份蔗糖、5～7份乳糖、10～20份葡萄糖、0.01～0.03份维生素C、0.1～0.3份硼酸、0.02～0.04份硫酸镁、0.01～0.03份硝酸钾、0.01～0.03份硝酸钙加入到900～1000份去离子水中，搅拌混合后灭菌，灭菌后得液体培养基；

（3）将除杂后避光保存的花粉加入液体培养基中，搅拌后置于培养箱中，在黑暗环境下培养，得到花粉培养液，放入低温冰箱中储存，储存后取出解冻，得解冻液；

（4）按重量份数计，分别选取100～120份解冻液、10～15份蔗糖、0.02～0.04份硼酸、0.001～0.003份硫酸锌，搅拌后得珊夏苹果花粉萌发液；

（5）将阿拉伯胶溶液和珊夏苹果花粉萌发液混合，即可得用于红富士苹果的授粉花粉悬浮液。

步骤（1）中所述的白炽灯的功率为25～30W。

步骤（1）中所述除杂后保存的花粉和液体培养基的质量比为1:1000。

步骤（3）中所述的培养箱温度为20～25℃，培养时间为5～7h。

步骤（3）中所述的低温冰箱温度为-15～-10℃。

步骤（3）中所述的解冻温度为5～8℃。

步骤（5）中所述的阿拉伯胶溶液和珊夏苹果花粉萌发液是按质量比1:10混合。

本发明与其他方法相比，有益技术效果是：

（1）本发明将收集得到的珊夏苹果花粉，通过培养法培养珊夏苹果花粉，在离体培养环境中，培养基承担起柱头和花柱的功能，通过培养，可以提高珊夏苹果花粉的原本的活性和萌发率；

（2）本发明将培养得到的花粉培养液进行冷冻保存，保存的目的是为了将花粉萌发率降到最低值，为后续花粉的萌发率和花粉管的伸长做准备，可以提高花粉的敏感度；

（3）本发明将培养得到的花粉培养液中添加硼酸、蔗糖、硫酸锌，给花粉培养提供碳源，加入硼酸是提升花粉细胞内部的代谢和吸收蔗糖的过程，能够加快珊夏苹果花粉萌发和花粉管伸长，使花粉的萌发率得到提高；

（4）本发明选取最有利于红富士花粉萌发和生长的悬浮液配方和温度，制备的用于红富士苹果授粉花粉悬浮液不会影响花粉的活性，易于花粉萌发，提高了红富士苹果的座果率。

具体实施方式