[发明专利]一种光学分子成像报告基因及其用途

权利要求书

1.一种光学分子成像报告基因，为SEQ ID NO.1序列整合入pcDNA3.1(+)/Luc2＝tdT(AddgenePlasmid 32904)质粒而得。

2.权利要求1所述的光学分子成像报告基因，其物理图谱如下图所示：

其中pcDNA3.1(+)为质粒骨架，Luc2＝tdT为该质粒所表达下游融合蛋白，CMV pro为启动子，XhoI和NotI为酶切位点。

3.权利要求1或2所述的光学分子成像报告基因的制备方法，包括：

a)合成miR‐200c的反向互补序列miR‐200c_3xTS，其序列为SEQ ID NO.1，在miR‐200c_3xTS的两端分别设计加入XbaI和NotI的酶切位点；

b)将miR‐200c_3xTS嵌入pcDNA3.1(+)/Luc2＝tdT；

c)连接的质粒转化入DH5α后，用含氨苄青霉素的LB培养基筛选目的质粒Luc2＝tdT‐miR‐200c‐3TS，挑取单克隆，获得序列正确的目的质粒。

4.权利要求1或2所述的光学分子成像报告基因在实时动态监测乳腺癌细胞中miR‐200c表达量的变化的用途。

5.一种高通量筛选平台，包括利用权利要求1或2所述的光学分子成像报告基因检测乳腺癌细胞中miR‐200c表达量的变化而反映乳腺癌细胞EMT转化过程。