[发明专利]用于肝细胞分离实验的灌流液灌注方法在审
| 申请号： | 201710413738.4 | 申请日： | 2017-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN108048389A | 公开（公告）日： | 2018-05-18 |
| 发明（设计）人： | 李阳;高毅;潘明新;彭青;徐小平;蒋泽生;程远;张斌斌 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学珠江医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京市立方律师事务所 11330 | 代理人： | 刘延喜;王增鑫 |
| 地址： | 510282 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 肝细胞 分离 实验 灌流 灌注 方法 | ||
1.用于肝细胞分离实验的灌流液灌注方法，其特征在于，包括：在肝组织块的表面选出多个穿刺区，每个所述穿刺区内选取至少三个穿刺点用于灌注灌流液；
在所述穿刺点的位置将注射器的注射口刺入所述肝组织块，并匀速灌注前灌流液，直至所述肝组织块由暗红色逐渐变为灰白色且流出的前灌流液变清亮，以去除所述肝组织块的血窦内的血细胞及非实质细胞；
再用注射器在所述穿刺区刺入所述肝组织块，并匀速灌流后灌流液，直至所述肝组织块变疏松、失去弹性，且表面呈龟背状裂隙；
停止灌流，至此灌注完成。
2.根据权利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述穿刺区选取在所述肝组织块上带有包膜的包膜区。
3.根据权利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述穿刺区均匀的分布于所述肝组织块的表面。
4.根据权利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，在所述肝组织块的表面选出多个穿刺区之前，还包括：用清洗液清洗待灌流的肝组织块表面的血污。
5.根据权利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，同一所述穿刺区内的多个所述穿刺点以不同的深度刺入所述肝组织块。
6.根据权利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述前灌流液的灌流速度为20ml/min。
7.根据权利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述肝组织块放置于恒温环境中，以保持所述前灌流液和所述后灌流液灌流过程中的温度恒定。
8.根据权利要求4所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述清洗液为D-Hank’s液。
9.根据权利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述前灌流液为预热的无钙平衡盐溶液。
10.根据权利要求1所述的灌流液灌注方法，其特征在于，所述后灌流液为预热的Ⅱ型胶原酶溶液。
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