[发明专利]多菌种发酵芝麻粕生产富含牛磺酸的菌肽饲料的制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及多菌种发酵芝麻粕生产富含牛磺酸的菌肽饲料的制备方法，属于农畜牧业技术领域。

背景技术：

饲料制造业竞争激烈，饲料价格居高不下,常规蛋白原料如豆粕、鱼粉紧缺导致价格不断上涨，饲料成本急剧增加、养殖收益不断降低，如何降低饲料成本成为市场广泛关注的问题。最常用的降低成本的方法是采用较经济的芝麻粕、棉粕等来代替部分传统性品质较高的豆粕及鱼粉。

芝麻粕、棉粕等植物源蛋白与鱼粉相比，缺少牛磺酸这一重要物质，而对于畜禽鱼类动物来说，牛磺酸是条件性必需氨基酸，因为其自生只能合成其生理所需的30％～40％，所以必须从食物中补充一部分。牛磺酸具有提高畜禽生长、繁殖性能，改善其免疫力，促进采食等生物学功能。研究表明，缺乏牛磺酸的植物源蛋白饵料会导致鱼体出现生长缓慢和一些病理现象，如绿色肝脏综合症和溶血性贫血等。

我国是世界芝麻产量最多的国家，芝麻粕是芝麻榨油后的副产物，成本比豆粕还要低20％-30％。其粗蛋白高达45％左右，蛋氨酸含量高出豆粕40％，而蛋氨酸正是牛磺酸合成途径的前体物质。多菌种固态发酵芝麻粕生产的菌肽饲料，能够解决动物的营养性腹泻；调理和激活细胞和机体的整体活性，促进动物的胃肠道功能，提高防疾病抗病能力；还能补充大量活性益生菌，增强有益微生物的生长繁殖，抑制大肠杆菌、沙门氏菌等有害菌的生长，改善肠道的微生态平衡，减少疾病的发生；提高动物机体的免疫功能，减少抗生素的用量；其中的营养物质能被道粘膜直接吸收，吸收速率快，有营养和提高免疫力双重功能。同时，通过微生物发酵作用，可以有效降低粕类中抗营养因子。

随着生物技术的发展，应用微生物发酵技术降解植物蛋白资源制备活性肽蛋白饲料，成为研究小肽的生物活性的重要手段，使高效、安全地获得活性肽制品成为可能。芝麻粕蛋白是一个十分丰富的肽资源库,用芝麻粕制备小肽饲料及添加剂，将成为提高芝麻副产品附加值,提高畜禽生产性能,改进畜禽品质的一个有效途径。通过微生物发酵制备新型绿色的饲用活性小肽制品，对改善动物营养和促进养殖业的健康发展是十分有益的。

发明内容：

针对上述问题，本发明要解决的技术问题是提供多菌种发酵芝麻粕生产富含牛磺酸的菌肽饲料的制备方法。

本发明的多菌种发酵芝麻粕生产富含牛磺酸的菌肽饲料的制备方法为：步骤一、牛肉膏蛋白胨培养基的配制：准确称取牛肉膏3g、蛋白胨5g、氯化钠10g放入烧杯中，加入1000mL水用玻璃棒搅拌均匀，然后调节pH 7.0～7.2；

马铃薯培养基的配制：马铃薯去皮，切成块加水煮沸30min，其中马铃薯:水＝1:4～6，然后用纱布过滤，再加入20g葡萄糖，搅拌均匀后补足水至1000mL；

查氏培养基的配制：准确称取硝酸钠2g、磷酸氢二钾1g、氯化钾0.5g、硫酸镁0.5g、硫酸亚铁0.01g、蔗糖30g放入烧杯中，加入1000mL水用玻璃棒搅拌均匀。

步骤二、菌种的活化、培养，将枯草芽孢杆菌YS-45、酵母S-78、黑曲霉PL-39的活化菌种分别加入15mL～20mL步骤一制备的牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基和查氏培养基，制成菌悬液，再将菌悬液在30℃～32℃、250r/min摇床中扩大培养12h～14h，离心后将上清液去除，即分别得到枯草芽孢杆菌YS-45种子菌悬液、酵母S-78种子菌悬液和黑曲霉PL-39种子菌悬液；

步骤三：将用于发酵生产含牛磺酸的菌肽饲料的原料：芝麻粕、麸皮、糖蜜、磷酸氢二钾、氯化钙搅拌混合均匀，在110℃～130℃高温蒸汽灭菌25min～35min，冷却后为固体发酵物，将步骤二中分别制备的芽孢杆菌YS-45、酵母S-78和黑曲霉PL-39种子菌悬液，各按4％～8％的体积比接种到灭菌好的固体发酵物中，再加入上述原料总质量的35％～40％的水，搅拌均匀，然后在固态发酵罐中在30℃～32℃条件下培养65h～70h，即得富含牛磺酸的菌肽饲料。

作为优选,所述的步骤三中用于生产多菌种发酵芝麻粕生产富含牛磺酸的菌肽饲料包含以下质量份数的原料：芝麻粕7-9份，麸皮0.5-1.5份，糖蜜0.3-0.7份，磷酸氢二钾0.1-0.4份，氯化钙0.1-0.4份。