[发明专利]一种青苔有效部位抗EV‑71病毒的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药活性成分生产提取工艺，涉及青苔抗病毒有效部位提取的新思路新方法以及在制药领域的新用途，具体涉及利用抗病毒追踪的方式提取分离纯化青苔抗肠道病毒71型有效成分抗病毒的研究。

背景技术

我国的中草药资源丰富，而且价格低廉，药源广泛，药理作用显著，不良反应小，随着筛选、提取、分离、纯化的技术不断提高，从中药中研究寻找具有抗病毒活性的成分已经成为开发抗病毒药物的重要途径之一。

青苔为苔藓类植物，属于苔藓植物门藓纲真藓目葫芦藓科葫芦藓属，生长在阴暗潮湿的地上、墙上、井中、屋瓦及水中等处。

手足口病（Hand-Foot-Mouth Disease,HFMD）是由肠道病毒引发的比较急性的病毒性传染病，大多数的手足口病患者是因为感染肠道病毒71型（Entervirus 71，EV71）所引起的。EV71是目前发现最晚的肠道病毒，且EV71的病毒危害性很强，主要引起婴幼儿（0～6岁）手足口病，还能够引起多种与神经系统相关的疾病，比如无菌性脑膜炎还有脑干脑炎等。手足口病和中枢神经系统感染是EV71感染而引起的两大常见临床症状。

青苔提取物具有抗肠道病毒71型的作用。

青苔味微咸，性寒无毒，入肝经，查阅相关资料，青苔具有抗菌消炎、清热解毒镇痛、凉血散瘀的功效。目前在抗病毒方面研究较少，是一种开发潜力广阔的植物药。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是明确了青苔抗EV-71病毒的有效部位，为该有效部位的分离提取提供了一种利用抗病毒追踪的方式制备青苔抗病毒有效部位的新方法。

本发明的优点是，本发明首次分离出了青苔中具有抗EV-71病毒的一种有效部位，并发明了一种抗病毒追踪的方法对该有效部位进行了制备，此分离方法目的性强，简单节省了大量的人力物力，优于传统的系统分离。制备得到的有效部位对EV-71病毒具有较好的治疗作用。

本发明青苔有效部位抗病毒的制备方法，包括如下步骤：

（1）取一定量的青苔水提；

（2）将提取液减压浓缩，浓缩至每毫升药液含有1克的药材，然后加乙醇调节乙醇的浓度为70%，静置24小时。过滤得到沉淀和上清液；

（3）将上清液回收乙醇，将沉淀用水溶解，分别进行抗病毒实验。实验显示沉淀的抗病毒效果较好；

（4）取一定的DM130型号大孔吸附树脂分别用95%的乙醇浸泡24小时，之后装柱，用蒸馏水洗至无醇味，然后用5倍柱体积5%的盐酸水溶液进行冲洗浸泡3个小时，之后用蒸馏水冲至PH等于7，再用5倍柱体积的5%的NaOH水溶液进行冲洗浸泡3个小时，之后用蒸馏水冲至PH等于7，备用；

（5）取（3）中的沉淀上样于处理好的大孔树脂柱，分别用水，25%乙醇，50%乙醇，75%乙醇进行冲洗，每个洗脱液中每200ml接一瓶，并且冲洗到没有颜色之后再换下一种洗脱液；

（6）将上述接到的样品进行抗病毒实验。实验显示经过大孔树脂的筛选，青苔的水相部位抗病毒效果较好。

具体实施方式

实例1（1）称取一定量的青苔，将水提取液减压浓缩至每毫升药液含有1克的药材，加乙醇调节溶液乙醇的浓度为70%，静置24小时；

（2）将（1）得到的醇沉液减压抽滤，得到沉淀，将沉淀用蒸馏水超声溶解；

（3）将（2）得到的溶液上样于处理好的DM130大孔吸附树脂，用水、不同浓度的乙醇进行冲洗，每200ml接一瓶，冲洗至无；

（4）合并（3）中水、不同浓度的乙醇部位，浓缩至一定体积；

（5）将（4）中得到的青苔不同洗脱部位分别进行抗病毒实验，结果显示水相的青苔提取物抗病毒效果较好。