[发明专利]基于荧光共振能量转移的AFP检测法

权利要求书

1.一种基于荧光共振能量转移的AFP检测法，其特征在于，利用荧光配对染料之间荧光共振能量转移快速均相检测广谱肿瘤标记物AFP，包括以下步骤：探针1和探针2的制备；探针1-AFP-探针2荧光共振能量转移体系制备；AFP的工作曲线绘制；待测样本测试。

2.权利要求1所述的基于荧光共振能量转移的AFP检测法，其特征在于，荧光配对染料为CdS QDs-罗丹明B配对染料、CdS QDs-红色荧光微球配对染料。

3.权利要求2所述的基于荧光共振能量转移的AFP检测法，其特征在于，CdS QDs的最大发射光谱与罗丹明B、红色荧光微球的最大吸收光谱有较好的重叠。

4.权利要求1所述的基于荧光共振能量转移的AFP检测法，其特征在于，探针1为CdS QDs标记的AFP抗体，探针2为罗丹明B或红色荧光微球标记的AFP抗体。

5.权利要求4所述的基于荧光共振能量转移的AFP检测法，其特征在于，探针1和探针2所标记的AFP抗体为配对抗体。

6.权利要求1所述的基于荧光共振能量转移的AFP检测法，其特征在于，探针1-AFP-探针2荧光共振能量转移体系为：

样本（标准品或待测样本） 2 μL

0.05mg/mL探针1 20 μL

0.05mg/mL探针2 10 μL

PBS缓冲液50 μL

ddH₂O补足至100 μL。

7.权利要求6所述的基于荧光共振能量转移的AFP检测法，其特征在于，荧光共振能量体系检测AFP的工作曲线步骤为：先将不同浓度标准品样本分别与探针1、PBS缓冲液接触混匀后，分别加入探针2，超纯水定容到100 μL；然后常温旋转30～60 min后，将该体系置于多功能酶标仪上检测荧光强度；记录混合液在探针2最大发射波长（580 nm或600 nm处）的荧光强度，存在AFP时F，不存在AFP时F₀，以（F-F₀）对AFP浓度绘制标准曲线。

8.权利要求7所述的基于荧光共振能量转移的AFP检测法，其特征在于，待测样品检测方法是通过探针1-AFP-探针2荧光共振能量转移体系检测待测样本的荧光信号，将待测样品的荧光信号变化值代入AFP标准曲线，得出待测样品中AFP的含量。