[发明专利]一株甲基营养型芽孢杆菌及其菌剂的制备和应用

说明书

本发明提供一株甲基营养型芽孢杆菌及其菌剂的制备和应用，属于农用微生物技术领域。本发明的甲基营养型芽孢杆菌HZ‑9，于2017年4月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.14022。本发明的菌株，具有较广的抑菌谱，对引起红掌细菌性叶斑病的病原菌以及葡萄炭疽病菌、尖孢镰刀菌、杨树腐烂病菌、立枯丝核菌、灰霉菌等病原菌具有较强的抑制效果，对引起红掌细菌性叶斑病的病原菌的抑制效果尤为显著，且能够在红掌根际、叶片及叶柄表面稳定定殖；利用该菌株制备的菌剂能够应用于红掌细菌性叶斑病等病害的预防和控制。

技术领域

本发明提供一株甲基营养型芽孢杆菌及其菌剂的制备和应用，属于农用微生物技术领域。

背景技术

红掌又名火鹤花、幸运花、安祖花等，是天南星科花烛属植物，原产地为南美洲热带雨林地区，现广泛栽培于亚洲、欧洲、非洲等地。该作物属多年生常绿草本花卉，其花型奇特，色彩鲜艳丰富，使用范围广，是在世界范围非常流行、备受亲睐的名贵花卉之一，具有很高的经济价值，在全球热带花卉贸易中，销量仅次于兰花。

近年来红掌细菌性病害在红掌的栽培过程中呈现明显增长的趋势，主要有细菌性叶斑病、细菌性叶枯病、细菌性枯萎病。尤其以细菌性叶斑病的增长趋势最为明显，其扩散速度快、危害大，给红掌产业造成了极大的危害。红掌细菌性叶斑病，是一种由地毯草黄单胞菌的花叶万年青致病变异种（Xanthomonas axonopodis pv.dieffenbachiae）引起的一类细菌病害。该病害的主要症状为染病之初，在红掌叶片上分布水渍状凹陷斑，病斑在侵染初期呈半透明状，其中新叶的病斑出现在叶脉间，斑点颜色呈褐色并伴有清晰的边缘，老叶的病斑通常出现在其叶部边缘，小点式排列。当空气湿度较大时，病斑迅速增多，在新叶的叶背部位可见充满棕褐色菌脓的斑点，当空气状湿度降低时，新叶叶背部位菌脓消失，病斑由棕褐色变为褐色或者黑色，并呈干枯状。病原菌的侵染可由叶柄维管束传播到茎基部维管束中，侵染过后维管束呈褐色，叶柄中出现菌脓，切断叶柄，菌脓则会从维管束中溢出。此时，发病严重的红掌叶片会出现萎蔫、枯死。如果病原菌侵染传输到茎基部，很有可能整个植株都会死亡。红掌细菌性叶斑病传播速度极快，死亡率很高，在发病严重的地区红掌细菌性叶斑病发病率达到100%，死亡率也高达80%以上。此病的流行严重影响了红掌产业的发展，制约了红掌的生产。

目前，防治红掌细菌性病害的主要措施仍然是化学农药防治。化学防治虽然具有抗菌谱广、成本低、使用便捷、高效稳定等诸多优点，但化学杀菌剂的大量使用带来的土壤、大气污染，生态平衡破坏，食品安全威胁，以及病原菌对农药的抗性增强等问题日益严重，因此，选择高效无毒、不污染环境且不易产生抗药性的生物防治方法进行植物病害的防治，日益受到人们的重视。但是针对红掌细菌性病害的生物防治制剂及方法十分缺乏。

发明内容

本发明的目的在于提供一株能对红掌细菌性叶斑病起到防控作用的甲基营养型芽孢杆菌及其菌剂的制备和应用。

本发明从红掌根际土壤中分离获得一株细菌，经鉴定为甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）；本发明将其命名为甲基营养型芽孢杆菌HZ-9。该菌株于2017年4月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。保藏号为CGMCC No. 14022。

本发明的甲基营养型芽孢杆菌HZ-9，菌体为杆状，为兼性厌氧发酵型，接触酶、硝酸盐还原、淀粉水解、V-P测定、明胶液化、柠檬酸盐利用和氮源利用等反应为阳性，甲基红试验和苯丙氨酸脱氨酶试验为阴性，能在NaCl质量浓度为2%和5%的LB固体培养基生长，生长12h后菌落隆起，表面干燥，为白色、不透明圆形。

本发明的甲基营养型芽孢杆菌HZ-9，其16SrDNA序列长度为1454bp，具体序列如SEQ ID NO.1所示。