[发明专利]欧亚类禽型H1N1亚型猪流感冷适应致弱株及其应用

说明书

本发明公开了一株欧亚类禽型H1N1亚型猪流感冷适应致弱疫苗株及其应用。本发明通过对欧亚类禽型H1N1亚型猪流感病毒A/swine/Guangxi/18/2011(H1N1)在33～25℃温度下进行系列传代培育，获得一株欧亚类禽型H1N1亚型猪流感冷适应致弱疫苗株，命名为猪流感冷适应致弱疫苗株A/swine/Guangxi/18/2011ca(H1N1)，保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO.V201720。研究表明，由该冷适应致弱疫苗株制备得到的减毒活疫苗能抵御我国猪群中主要流行的猪流感病毒野毒株的攻击，对于控制欧亚类禽型H1N1亚型以及H1N2亚型猪流感病毒的流行和对人的感染具有重要意义。

技术领域

本发明涉及一株流感病毒弱毒疫苗株，特别涉及一种通过对欧亚类禽型(Eurasian avian like,EA)H1N1亚型猪流感病毒(Swine influenza A virus,SIV)在SPF鸡胚中逐步降低温度培养获得广谱性冷适应致弱疫苗株，还涉及该疫苗株在预防和控制EAH1N1亚型猪流感病毒中的应用。本发明属于兽用药物技术领域。

背景技术

猪流行性感冒是由猪流感病毒(Swine influenza A virus,SIV)引起的猪的一种急性、传染性呼吸道传染病。其特征为突发、咳嗽、呼吸困难、发热及迅速转归。通常情况下猪流感死亡率低，发病率高，在世界范围内广泛流行，对养猪业造成了巨大的经济损失。

猪流感病毒主要有3种亚型：H1N1、H3N2和H1N2亚型，其中H1N1亚型又可划分不同的基因型：经典型(Classical,CS)H1N1，EA H1N1，pandemic H1N1/2009(pH1N1/2009)等。1979年EA H1N1亚型SIV首次在欧洲国家出现，病毒由水禽野鸭传入到猪群，并迅速取代欧洲猪群中的经典型H1N1 SIV，在欧洲多个国家如法国、英国、意大利和德国猪群中流行。2001年，该病毒在我国香港首次分离，然后在我国大陆的河南、福建、江苏、山东和陕西等省份都有分离。根据持续的监测数据，到目前为止，这一类病毒仍是欧洲和亚洲猪群中流行的主要亚型，对养猪业造成了巨大的经济损失。

猪在流感病毒的传播中具有重要的地位，它的呼吸道上皮细胞同时具有人流感病毒受体(SAα2，6Gal)和禽流感病毒受体(SAα2，3Gal)，是猪、禽、人流感病毒共同的易感宿主，可称之为流感病毒基因重配的混合器。SIV可以直接感染人，是一种人兽共患病。据统计在2006年4月之前，有50人被感染SIV的报道，致死率14％，其中61％有直接接触猪的流行病学背景。在过去100年间，给人类带来巨大灾难的流感病毒有四种，分别是：1918年H1N1亚型西班牙流感，1957年H2N2亚型的亚洲流感，1968年H3N2亚型香港流感和2009年源于北美的甲型H1N1亚型流感(pandemic H1N1/2009，pH1N1/2009)。

pH1N1/2009毒株是一株重组病毒，其所有基因片段来自SIV，其中NA和M基因来源于EA H1N1 SIV，PB2、PB1、PA、HA、NP和NS基因来源于北美三重组H1N2SIV，再一次凸显了猪流感在人类流感大流行中重要的公共卫生学意义。pH1N1/2009毒株HA基因来源于CS H1N1SIV，人群普遍缺少相应的抗体，表现出了高效人间传播能力。从2009年开始，在世界范围内，pH1N1/2009毒株已经替代传统的季节性H1N1亚型流感，成为人类新的季节性流感毒株之一。2011年以来，美国的13个州发生了人感染H3N2亚型变异株300多例，病毒是由北美三重组H3N2亚型SIV获得了pH1N1/2009毒株M基因形成。以上研究说明猪流感病毒不仅对养猪业造成经济损失的同时，还具有重要的公共卫生意义。

研究表明，对于EA H1N1毒株人群缺少相应的保护性抗体。