[发明专利]一种海洋真菌来源的苯酚类衍生物的制备方法

说明书

本发明涉及一种海洋真菌来源的苯酚类衍生物的制备方法，具体涉及一种同时制备苯酚类衍生物1‑3的方法，其特征在于包括以下步骤：先在菌种培养基中对海洋真菌Penicillium purpurogenum进行菌种培养，再在发酵培养基中对上述海洋真菌进行发酵培养，得发酵物后，用乙酸乙酯萃取2–4次，合并乙酸乙酯萃取液后减压浓缩得粗浸膏，进行色谱分离，分别得到化合物1‑3；所述苯酚类衍生物1‑3具有如下结构：

技术领域

本发明属于海洋天然药物化学领域，涉及一种海洋真菌来源的苯酚类衍生物的制备方法。

背景技术

自从1929年从真菌中制备出青霉素以来，真菌的代谢产物成为了药物的丰富来源，绝大多数临床应用的抗生素都来源于真菌和细菌。真菌的代谢产物还有其它的药用价值，如抗肿瘤，治疗心血管疾病，酶抑制剂等。近年来，随着海洋天然药物化学的发展，越来越多的具有酶抑制活性的化合物从海洋微生物中不断分离获得，为寻找新型酶抑制剂提供了物质基础。采用人工培养发酵的方法，从海洋微生物中获得有重要酶抑制活性的次级代谢产物，具有环境友好、可持续发展等特点，能有效解决药物开发过程中的药源等关键性问题，因此具有独特优势。

发明内容

本发明提供一种海洋真菌Penicillium purpurogenum，该真菌分离自蕾二歧灯芯柳珊瑚，其中蕾二歧灯芯柳珊瑚是发明人于2008年9月采自中国北海广西涠洲岛。上述海洋真菌Penicillium purpurogenum的菌种保藏信息：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2017年5月4日；保藏编号：CGMCC No.13778；分类命名：产紫青霉Penicillium purpurogenum。

本发明的另一实施方案提供一种苯酚类衍生物，其特征在于所述苯酚类衍生物具有化合物1-3所示结构：

本发明的另一实施方案提供一种同时制备化合物1-3的方法，其特征在于包括以下步骤：先在菌种培养基中对海洋真菌Penicillium purpurogenum进行菌种培养，再在发酵培养基中对上述海洋真菌进行发酵培养，得发酵物后，用乙酸乙酯萃取2–4次，合并乙酸乙酯萃取液后减压浓缩得粗浸膏，进行色谱分离，分别得到化合物1-3；其中所述的菌种培养基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、琼脂、粗海盐、水；所述的发酵培养基中含有大米、粗海盐、水；所述的色谱分离为依次进行正相硅胶柱色谱分离、反相硅胶柱色谱分离、凝胶柱色谱分离和高效液相色谱分离。

上述制备方法中所述的菌种培养基优选含有葡萄糖1.0％–10％、酵母膏0.1％–4.0％、蛋白胨0.2％–4.0％、琼脂1.0％–6.0％、粗海盐3.0％–10％，其余为水，上述百分含量均为重量百分比；培养温度为15–35℃；培养时间为3–10天；所述的发酵培养基中大米、粗海盐和水的含量为每个500mL锥形瓶中含有大米50–150g，粗海盐1–10g，水50–150mL；培养温度为15–35℃；培养时间为20–50天；所述的正相硅胶柱色谱分离为先采用固定相为100～200目硅胶，流动相为50％–60％(体积百分比，下同)的乙酸乙酯/石油醚混合溶剂，洗脱体积优选为3-5个柱体积，然后再采用的固定相为200～300目硅胶，流动相为50％–55％的二氯甲烷/甲醇混合溶剂，洗脱体积优选为2-3个柱体积；反相硅胶柱色谱分离中采用的固定相优选为C₁₈硅胶，流动相优选为35％–45％(体积百分比)的甲醇/水混合溶剂，洗脱体积优选为2-3个柱体积；凝胶柱色谱分离的固定相为sephadex LH-20，流动相为二氯甲烷，洗脱体积优选为3-5个柱体积；高效液相色谱分离中采用的色谱为半制备C₁₈色谱柱，Kromasil,7μm,10×250mm，流动相为45％–50％的甲醇/水混合溶液。

本发明的另一实施方案中提供一种酶抑制剂，其特征在于包含化合物1、2或3或其药学上可接受的盐作为有效成分；还可包括其他酶抑制活性成分和/或药学上可接受的载体或赋形剂。