[发明专利]一种鉴别翘嘴鲌与三角鲂杂交个体的方法有效
申请号: | 201710381826.0 | 申请日: | 2017-05-26 |
公开(公告)号: | CN107058572B | 公开(公告)日: | 2020-03-31 |
发明(设计)人: | 李喜莲;顾志敏;杨元杰;刘金殿;蒋文枰;贾永义;刘士力;郭建林 | 申请(专利权)人: | 浙江省淡水水产研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888 |
代理公司: | 杭州知见专利代理有限公司 33295 | 代理人: | 赵越剑 |
地址: | 313001 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴别 翘嘴鲌 三角 杂交 个体 方法 | ||
1.一种鉴别翘嘴鲌与三角鲂杂交个体的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)DNA提取:提取样品鱼鳍部位的基因组DNA;
(2)PCR扩增:采用翘嘴鲌分辨引物A、三角鲂分辨引物B分别同时对提取的样品鱼鳍部位的基因组DNA进行PCR扩增;
(3)结果判断:对PCR扩增产物进行凝胶电泳,根据电泳结果判断样品是否为翘嘴鲌与三角鲂杂交个体,若翘嘴鲌分辨引物A的PCR扩增产物电泳出现一条条带,大小在648bp;同时三角鲂分辨引物B的PCR扩增产物电泳出现两条条带,大小在540bp和780bp,则表明样品为翘嘴鲌与三角鲂杂交个体;
所述翘嘴鲌分辨引物A为:
F:5’-GTACGACCCCGATTGCAAAAG-3’;
R:5’-GAGACACAAGCTGCGGTG-3’;
所述三角鲂分辨引物B为:
F:5’- TTCTTCCAGGGGCATTGGTG-3’;
R:5’- GGTTTCTTTGCTGTCCTGGTG-3’。
2.根据权利要求1所述的一种鉴别翘嘴鲌与三角鲂杂交个体的方法,其特征在于,步骤(2)PCR扩增的程序设置为:98℃预变性30s,后经过35个循环,每个循环包括98℃、10 s,56℃、30 s,72 ℃、15 s;最后72 ℃延伸5 min。
3.根据权利要求1所述的一种鉴别翘嘴鲌与三角鲂杂交个体的方法,其特征在于,所述翘嘴鲌与三角鲂杂交个体的体长在3cm以下。
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