[发明专利]用于鼻咽癌诊断的miRNA

说明书

本发明公开了用于鼻咽癌诊断的miRNA，发明人通过实验发现EBV‑miR‑BART8在鼻咽癌组织中明显高表达，为非癌鼻咽组织的11倍。qPCR证实EBV‑miR‑BART8不仅在鼻咽癌组织中明显高表达，且其表达量与鼻咽癌患者的TMN分期和临床分期呈正相关，暗示EBV‑miR‑BART8有可能是鼻咽癌发生发展中的重要调控因子。进一步的研究表明，高表达EBV‑miR‑BART8的鼻咽癌细胞株具有更强的侵袭及转移能力，沉默内源性EBV‑miR‑BART8表达后，HONE1‑EBV鼻咽癌细胞转移能力减弱。EBV‑miR‑BART8有可能通过促进鼻咽癌细胞的EMT而使鼻咽癌细胞具有更强的转移及侵袭能力。通过检测患者EBV‑miR‑BART8的表达量，可以有效辅助NPC的诊断。通过调降EBV‑miR‑BART8的表达量，有望辅助NPC的治疗。

技术领域

本发明涉及试剂的新应用，特别涉及检测试剂作为鼻咽癌诊断试剂的应用。

背景技术

鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)是我国南方及东南亚地区常见的一种恶性肿瘤，其恶性程度较高，转移较早，约30％-50％的鼻咽癌患者就诊时已发生颈部淋巴结转移和远处转移。随着鼻咽癌诊断和治疗方法的逐步提高，鼻咽癌患者的局部控制率得到显著改善，但局部复发和远处转移仍是鼻咽癌治疗失败的主要原因。

转移是导致肿瘤复发，预后差和死亡的主要原因。上皮间充质转化(EMT)，是指上皮细胞失去细胞极性，失去与基底膜的连接等上皮表型，获得较高的迁移与侵袭、抗凋亡和降解细胞外基质的能力等间质表型。目前认为EMT是使肿瘤细胞获得转移潜能得关键因素。越来越多的研究表明EMT与上皮细胞恶性肿瘤的发生和发展关系密切，EMT现象也在多种实体肿瘤中被报道，如乳腺癌、结肠癌、肝癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、鼻咽癌等。细胞发生EMT时，在形态上主要表现为多变形细胞向长梭形细胞转化，同时伴随着细胞表面分子的变化，E-钙粘蛋白(E-cadherin)的减少是或丢失是EMT最重要的标志性变化，伴随着一些EMT转录因子，例如Twist1，SIP1，Slug和Snail等基因表达增高。了解EMT发生的分子机制及过程，将会为以EMT为主要治疗靶标的鼻咽癌治疗方法提供新的前景。

如何在早期对NPC进行诊断，特别是在NPC未发生转移前诊断，具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供EBV-miR-BART8检测试剂在制备NPC诊断试剂，特别是早期诊断试剂中的应用。

发明人通过实验发现，检测到EBV编码的miR-BART8(EBV-miR-BART8)在鼻咽癌组织中明显高表达，为非癌鼻咽组织的11倍。利用荧光定量PCR(Real time quantitativePCR，qPCR)实验方法对芯片结果进行验证，证实EBV-miR-BART8不仅在鼻咽癌组织中明显高表达，且其表达量与鼻咽癌患者的TMN分期和临床分期呈正相关，暗示EBV-miR-BART8有可能是鼻咽癌发生发展中的重要调控因子。

进一步的研究表明，与对照组细胞株相比，高表达EBV-miR-BART8的鼻咽癌细胞株具有更强的侵袭及转移能力，沉默内源性EBV-miR-BART8表达后，HONE1-EBV鼻咽癌细胞转移能力减弱。EBV-miR-BART8有可能通过促进鼻咽癌细胞的EMT而使鼻咽癌细胞具有更强的转移及侵袭能力。

通过检测患者EBV-miR-BART8的表达量，可以有效辅助NPC的诊断。通过调降EBV-miR-BART8的表达量，有望辅助NPC的治疗。

附图说明

图1是EBV-miR-BART8与鼻咽癌TNM分期相关；

图2是稳转EBV-miR-BART8鼻咽癌细胞株的建立；

图3是Transwell和Boyden小室实验结果；