[发明专利]便携式致病菌核酸提取装置及检测方法有效
申请号: | 201710375817.0 | 申请日: | 2017-05-24 |
公开(公告)号: | CN107190002B | 公开(公告)日: | 2019-10-01 |
发明(设计)人: | 凌睿;胡睿;黄雪莉;张腾 | 申请(专利权)人: | 重庆大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;H02J7/00 |
代理公司: | 重庆天成卓越专利代理事务所(普通合伙) 50240 | 代理人: | 路宁 |
地址: | 400045 *** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 便携式 致病菌 核酸 提取 装置 检测 方法 | ||
1.一种便携式致病菌核酸提取装置,其特征在于,包括:铝质加热域(2)、隔热板(1),控制电路板(4)、96孔板(7)、96孔板固定片(6);电源单元、恒温控制单元、人机交互单元;
所述的电源单元包括电源适配器和电池供电两种供电方式;电源适配器提供9V的输入电压,电池采用两节串联的磷酸铁锂电池,提供5V-7V的输入电压;电源单元的输出端连接恒温单元的电源输入端,所述电源单元电源输出端通过电源隔离芯片和稳压芯片转为3.3V连接控制芯片的电源输入端,同时还连接到人机交互单元的电源输入端;
加热片固定在加热域(2)和隔热板中(1)的凹槽处,温度检测器固定在在加热槽的小孔内(3),96孔板(7)通过固定片(6)固定在加热域上;在96孔板(7)中加入提取试剂提取病菌核酸;
所述核酸提取磁力架包括:提手(8)、弹力固定夹(9)、耐热聚丙烯管套(10)、磁力棒(11);
提手(8)下端安装固定板,固定板下端安装用于固定耐热聚丙烯管套(10)的弹力固定架(9),磁力棒(11)通过螺纹固定在安装板上;上诉的核酸提取磁力架探入96孔板内,利用磁力吸附小磁珠的方法提取核酸;
还包括:四路加热域(2);
所述的加热域(2)共有四路,96孔板(7)有12行,提取操作包括裂解、洗涤1,洗涤2,洗涤3,洗涤4,洗脱,其中,裂解和洗脱需要高温加热,洗涤常温即可,于是,一次提取操作需要两路加热域,核酸提取装置一次可进行两种病菌的提取;
所述人机交互单元还包括:数码管显示模块和按键设置模块,所述显示模块和设置模块安装外壳上,连接到电路板上,用于设置数据和显示。
2.根据权利要求1所述的便携式致病菌核酸提取装置,其特征在于,所述恒温控制单元包括:温度传感器、陶瓷加热片和MOS管,
所述加热片的一端连接MOS管漏极,另一端连接电源正极,所述电源负极连接MOS管源极,所述MOS管栅极连接控制芯片PWM发出的控制信号,所述温度传感器温度信号输入端检测加热域温度,所述温度传感器温度信号输出端连接控制器AD检测端口,输入温度信号。
3.根据权利要求1所述的便携式致病菌核酸提取装置,其特征在于,所述供电单元包括:充电模块,完成对磷酸铁锂电池的充电;电量检测模块,检测电池的电量;切换模块,在电池供电和适配器供电之间自由切换。
4.一种用于权利要求1-3任一项所述的便携式致病菌核酸提取装置的提取方法,其特征在于,包括:
步骤1,在96孔板中加入相应的液体:
在96孔板中1至6列分别加入裂解液、洗涤液、洗涤液、洗涤液、洗涤液、洗脱液,并在第一列中加入病菌菌液;
步骤2,通过加热器对病菌进行加热,完成病菌裂解和洗脱的操作,加热控制方法为:
温度传感器检测到实时的温度数据T,传给微控制器,微控制器将采集到的温度数据与预设温度值T0进行比较,得到温度误差e,经过滑模变结构控制算法计算出控制量,控制器给出控制信号u,控制信号驱动加热器加热或者停止加热;通过不断地检测实时温度,不断的调整控制信号,使得温度差尽量的趋于零,进而达到控制精度较高的恒温效果;
步骤3,利用磁珠吸附原理完成对核酸的提取,
对96孔板的第1列和第6列进行加热,并在第一列加入小磁珠,利用所述磁力架在第1列上下移动,破坏细胞的生物结构,释放DNA,磁珠会与DNA结合,在磁场的作用下,核酸提取装置上的磁力棒将磁珠吸走,这样就到达了提取核酸的目的;提取之后,在第2-5列洗涤小磁珠,并在第6列洗脱,最终可得提纯的病菌核酸。
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