[发明专利]一种赭曲霉毒素金属有机骨架-分子印迹复合的分离介质的制备方法及应用

说明书

本发明属于分离介质制备技术领域，特别涉及一种赭曲霉毒素金属有机骨架‑分子印迹复合的分离介质的制备方法及应用，并以此作为固相萃取柱的填料应用于复杂基质中赭曲霉毒素选择性的富集、分离。所述印迹聚合物以赭曲霉毒素的结构类似物作为替代模板，将金属有机骨架与印迹聚合物相结合，制得赭曲霉毒素的金属有机骨架‑分子印迹复合的分离介质。本发明所制备的分离介质兼具金属有机骨架的多孔性特点和分子印迹聚合物对目标分子的分子识别能力，能够对赭曲霉毒素选择性的富集和分离，将其应用于复杂基质的样品前处理中，达到较好的净化、富集效果，有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于食品安全分析检测技术领域，特别涉及一种适用于复杂基质中对赭曲霉毒素具有特异性分子识别能力的金属有机骨架-印迹聚合物的制备方法及其应用。

背景技术

赭曲霉毒素主要由曲霉属和青霉属菌株产生，具有致畸性，胚胎毒性，遗传毒性，神经毒性，免疫抑制性，致癌性，以及肾毒性，更为严重的是，它可以在离开宿主真菌的条件下继续存在，并且在人体内有长达35天的较长半衰期。因此，赭曲霉毒素已在世界范围内引起了广泛的关注，国际癌症研究机构已将赭曲霉毒素列为可能的致癌物质(2B类)。

2011年最新国标规定谷物及其制品中赭曲霉毒素A的最高限量值为5μg kg^-1。由此可见，食品中OTA检测水平的灵敏性和特异性显得至关重要。

现在常用的真菌毒素检测方法有薄层色谱法(TLC)、免疫亲和柱-高效液相色谱法、紫外、荧光、质谱检测器以及酶联免疫吸附试验(ELISA)。但在化学分析中,实际样品的成分复杂，干扰物质较多,如果所分析的样品没有得到有效的处理，会导致其最终的检测数据有极大的误差，并且对精密的实验仪器造成不可估量的损害。实际样品的预处理非常耗时，且影响其检测效果，因此新型样品预处理方法的研究意义重大。

目前赭曲霉毒素的前处理除了液液萃取、固相萃取等传统方法外，免疫亲合柱是常用的样品前处理方法，但免疫亲合柱的净化效果容易受样品基质、pH、溶剂、盐浓度等的影响，同时其价格昂贵，难于重复使用，不适宜大面积推广使用，很大程度上限制了赭曲霉毒素检测的普及。

新近发展起来的分子印迹聚合物作为固相萃取柱的填料，以其高选择性和特异性的吸附能力、重复性高、检测线低、又不易受样品基体的干扰的特点，正被逐渐应用到食品中对痕量有毒有害物质的前处理过程中，弥补了传统固相萃取和免疫亲和柱的不足。

由于赭曲霉毒素有较强毒性和广泛传播性对试验操作人员有很强的毒性作用，毒素获取困难，价格昂贵。用毒素本身作模板分子会增加实验的成本和操作的危险性，所以研究用赭曲霉毒素的结构类似物作为替代模板合成印迹聚合物，避免了其中的模板因未洗脱完全，对目标分析物的检测造成干扰，降低对实验人员的伤害，毒素的特异性吸附不会造成太大影响且符合环境友好的要求。本发明中采用赭曲霉毒素的结构类似物作为替代模板合成印迹聚合物。

分子印迹技术虽然有制备方法简单，特异选择性好等特点，但合成的的聚合物的表面积较小，与毒素接触不充分，导致吸附速率较慢等缺点，不能使复杂基质中痕量的毒素充分富集，为进一步增加吸附量，本发明尝试将具有多空结构的金属有机骨架材料作为载体来合成新型的金属有机骨架-分子印迹复合物。这种复合物将两种材料的优点结合起来，不仅特异选择性好，而且接触面积大，吸附速率和吸附量也有很大程度提高，随着研究的进一步深入，这种新型复合物将具有极为广阔的应用前景，目前尚未见报道。

发明内容

针对复杂基质中存在的痕量赭曲霉毒素，样品前处理采用传统的液液溶剂萃取效率低，使用商品化的免疫亲和柱净化效果容易受样品基质、pH、溶剂、盐浓度等的影响，同时其价格昂贵，难于重复使用等问题，本发明以金属有机骨架为载体，采用沉淀聚合的方法合成金属有机骨架-分子印迹复合物，拟解决的技术问题是提供一种适用于复杂基质中对赭曲霉毒素具有特异性分子识别能力的金属有机骨架-分子印迹复合物的制备方法。

本发明实现上述目的的技术解决方案如下：