[发明专利]氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测用质控品及其配制方法，特别涉及氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品及其制备方法。

背景技术

遗传代谢病是指由于基因突变使合成的酶、受体、载体等蛋白功能缺陷，导致体内生化物质在合成、代谢、转运和储存等方面出现各种异常。它属于单基因遗传病的一部分，绝大多数属常染色体隐性遗传，少数为常染色体显性遗传、X连锁伴性遗传，或者线粒体遗传；遗传代谢病病种繁多，常见500-600种，总数可能达数千余种；单病发病率低，但总体发病率较高，有报道患病率在0.5％以上。

新生儿疾病筛查是预防出生缺陷行之有效的三级预防措施，对提高出生人口素质有着重要的意义。串联质谱检测的遗传代谢病项目在2分钟内可检测18种氨基酸和45种酰基肉碱，上述遗传代谢病可检测超过45种遗传代谢病，目前已广泛应用于各种高端实验室，可更有效、更早地检出遗传性代谢性疾病，为针对性治疗提供有效依据。随着该技术越来越多地应用于临床的辅助诊断，体内氨基酸和酰基肉碱测定的准确性显得越来越重要。

质控品是专门用于室内质量控制的、稳定的、与待测样品近似的材料，是保证准确测定的重要基础，并可对方法稳定性进行一个长期有效的监控，随着串联质谱检测越来越多地应用于临床的辅助诊断，相关质控品的需求量也逐渐增大。

由于串联质谱一次检测的化合物种类繁多，一般而言，为保证其质控效果，其质控品中也需要添加多种组分，而因为各组分的特性不同，难以制备得到均一稳定的质控品。因此，目前，商品化氨基酸和酰基肉碱干血斑质控品来源少，且产品价格昂贵，到货周期长，同一批号无稳定性来源。因此，研发稳定性、均一性都符合要求的质控品制备方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种成份相对简单、稳定性、均一性均符合要求的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品及其制备方法。

本发明所采取的技术方案是：

一种氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品，主要由氨基酸标准品、酰基肉碱标准品和红细胞干固于载体上形成，其中，氨基酸标准品包括丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、瓜氨酸、精氨酸、酪氨酸共8种氨基酸。

作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，酰基肉碱标准品包括游离肉碱、乙酰肉碱、丙酰肉碱、丁酰肉碱、异戊酰肉碱、己酰肉碱、辛酰肉碱、葵酰肉碱、月桂酰肉碱、肉豆蔻酰肉碱、棕榈酰肉碱、十八碳酰肉碱、3-羟基异戊酰肉碱、戊二酰肉碱、丙二酰肉碱共15种酰基肉碱。

作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，质控品中各氨基酸按照以下述终摩尔比配合：

作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，质控品中各酰基肉碱按下述终摩尔比配合：

作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，载体为滤纸。滤纸可以是国际903滤纸片等本领域常用的滤纸。

一种上述的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的制备方法，包括如下步骤：

1)制备红细胞液：收集健康人源全血，分离得到红细胞，用生理盐水调整红细胞比容至预定值，得到红细胞液，并测定其中各氨基酸和酰基肉碱本底值；

2)制备标准溶液：使用水性溶剂将氨基酸和/或水溶性酰基肉碱溶解；使用醇类溶剂溶解脂溶性酰基肉碱，得到氨基酸标准溶液和/或酰基肉碱标准溶液；

3)制备血斑质控品：在上述红细胞液中添加氨基酸标准溶液和/或酰基肉碱标准溶液至设定值，得到工作液；取上述工作液滴加在载体上，干燥得到氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品。

作为上述制备方法的进一步改进，水性溶剂为生理盐水，所述氨基酸为：丙氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、瓜氨酸、精氨酸、亮氨酸和酪氨酸；所述水溶性酰基肉碱为：游离肉碱、乙酰肉碱、丙酰肉碱、丁酰肉碱、异戊酰肉碱、己酰肉碱、辛酰肉碱、葵酰肉碱、3-羟基异戊酰肉碱、戊二酰肉碱和丙二酰肉碱；醇类溶剂为甲醇，所述脂溶性酰基肉碱为：月桂酰肉碱、肉豆蔻酰肉碱、棕榈酰肉碱、十八碳酰肉碱。

作为上述制备方法的进一步改进，制备红细胞液步骤中，红细胞比容的预定值为45～55％。