[发明专利]一种金钱蒲的组织培养繁育方法

权利要求书

1.一种金钱蒲的组织培养方法，包括以下步骤：

1)外植体消毒：对金钱蒲外植体进行消毒；

2)诱导和增殖培养：将消毒的金钱蒲外植体接入到诱导培养基中，培养至长成茎尖苗，继续培养诱导增殖丛生芽的分化；

3)继代培养：将分化诱导的外植体转接到增殖培养基中，继代培养25～30d后，转入相同增殖培养基相同条件下继代1次～2次，将培养出诱导分化的苗转入步骤(4)培养；未成苗的丛生芽转入增殖培养基中，并在与继代培养所述的相同的培养条件下继续培养，待培养出诱导分化的苗转入步骤(4)培养；

4)生根培养：将获得的苗接种到生根培养基中，培养至植株基部长出根；

5)炼苗与移栽：将植株基部有根的幼苗进行常规炼苗，消毒后移栽至育苗袋中生长，即得金钱蒲移栽苗；

所述步骤1)的金钱蒲外植体为金钱蒲根茎两侧萌发的茎尖；

所述诱导培养基、增殖培养基的配方为:

MS基本培养液

所述步骤4)中生根培养基的配方为

MS基本培养液

2.根据权利要求1所述的金钱蒲的组织培养方法，其特征在于，所述诱导培养基与增殖培养基相同，所述诱导培养、增殖培养与继代培养、生根培养的培养条件相同。

3.根据权利要求1所述的金钱蒲的组织培养方法，其特征在于，所述步骤1)的消毒方法为用洗衣粉清洗干净，流动的自来水冲洗1小时，再用72％硫酸链霉素浸泡3小时；再在超净环境下用质量分数为75％的酒精浸泡30-40s后，依次放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中消毒20min，加入两滴吐温的次氯酸钠混合液中消毒15min，再用无菌水冲洗4～5次，每次1～2min；其中所述的次氯酸钠混合液是由次氯酸钠溶液加入吐温20混合而成，次氯酸钠溶液与吐温20的配比是：质量分数为2％的次氯酸钠溶液100ml中加入2滴吐温20。

4.根据权利要求1所述的金钱蒲的组织培养方法，其特征在于，所述诱导培养、增殖培养与继代培养、生根培养的培养条件为在温度为25℃±2℃，光照强度为1800lx～2000lx，光照时间为10～12h/d。

5.根据权利要求4所述的金钱蒲的组织培养方法，其特征在于，所述诱导培养、生根培养的条件为温度为25℃±2℃，光照强度为2000lx，光照时间为10～12h/d。

6.一种用于金钱蒲的组织培养的培养基，包括诱导培养基、增殖培养基与生根培养基；所述诱导培养基、增殖培养基的配方为:

MS基本培养液

所述生根培养基的配方为

MS基本培养液