[发明专利]一种抑制α糖苷酶活性的多肽及其应用

说明书

本发明属于生物制药领域，具体属于一种抑制α糖苷酶活性的多肽及其应用，尤其涉及天然提取亚麻双功能多肽和原核重组表达多肽，以及它们在功能食品及降糖药物制备中的应用。这些多肽的氨基酸序列具体为：SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：6。所述多肽可通过从天然亚麻中提取，人工合成、或通过原核细胞或真核细胞表达纯化获得。

技术领域

本发明涉及生物制药领域，具体涉及一种可口服的抑制α糖苷酶活性的多肽及其衍生物制备和用途。

背景技术

糖尿病作为一种慢性代谢疾病，具有多种并发症，会对人体的神经系统、泌尿系统以及视觉系统等产生重大的影响。对于糖尿病的临床治疗来说，主要包括两个方面，一方面注射可以降低血糖的胰岛素。另一方面是口服降血糖药物，主要包括：胰岛素促泌剂、α-葡萄糖苷酶抑制剂、双胍类以及噻唑烷二酮类四种口服降糖药。α-葡萄糖苷酶抑制剂可以抑制小肠中糖类的吸收，延缓D-葡萄糖释放和吸收，以一种非侵害型的方式有效地调节了血糖水平和胰岛素反应。目前α糖苷酶抑制剂的药物多以阿卡波糖、米格列醇、伏格波列糖等有机小分子为主。现在有文献报道的具有α糖苷酶抑制活性的天然植物的产物集中在黄酮类、皂甙类、植物酸类以及多糖。只有豆科的白色扁豆、豇豆、大花田菁中有文献报道存在抑制α糖苷酶蛋白类活性成分。本发明中兼具抑制α糖苷酶活性和胰蛋白酶活性的多肽属于首次提及。

发明内容

本发明的目的是提供一种抑制α糖苷酶活性的多肽，所述多肽有的兼具抗胰蛋白酶活性能力。

本发明提供的一种抑制α糖苷酶活性的多肽(亚麻多肽，简称LUTI)，该多肽的制备，参见发明人公开专利“一种从亚麻蛋白粉中提取胰蛋白酶抑制剂方法”(公开号：CN105566491A)。本发明在对多肽的生物学活性测定中，发现该多肽不仅具有胰蛋白酶抑制活性，还具有α糖苷酶抑制活性，适合开发功能食品或口服降糖药物。本发明人委托公司对该多肽进行质谱分析，获得了多肽的氨基酸序列信息。所述亚麻多肽，具有序列表SEQ IDNO：6所示氨基酸序列。

本发明又根据LUTI的氨基酸序列序列表SEQ ID NO：6，首先进行密码子优化，化学合成适合大肠杆菌表达的编码基因，再经多点氨基酸添加、替代的突变，获得一些或提高α糖苷酶抑制活性，或提高胰蛋白酶抑制活性，或两者均提高的重组多肽，简称DFI，这些多肽具有序列表SEQ ID NO：1所示氨基酸序列，其可应用于功能食品、生物制药领域。

所述兼具胰蛋白酶抑制活性和α糖苷酶抑制活性重组多肽，具有序列表SEQ IDNO：2所示氨基酸序列。

所述兼具胰蛋白酶抑制活性和α糖苷酶抑制活性重组多肽，具有序列表SEQ IDNO：3所示氨基酸序列。

所述具有α糖苷酶抑制活性重组多肽，具有序列表SEQ ID NO：4所示氨基酸序列。

所述具有α糖苷酶抑制活性重组多肽，具有序列表SEQ ID NO：5所示氨基酸序列。

上述的任一抑制α糖苷酶活性的多肽可在制备降糖功能食品及口服降血糖药物中应用。

本发明的抑制α糖苷酶活性的多肽由于兼具胰蛋白酶抑制活性，具有较强的抗肠道蛋白酶水解能力因此可通过口服给药，在Ⅱ型糖尿病治疗中有很好的应用前景。

下面结合具体实施例和附图对本发明做进一步说明。

附图说明

图1.重组多肽DFI1的制备过程电泳图

具体实施方式

下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法。

天然提取或重组表达的多肽的简称代码与序列表中序列号的对应关系为：DFI1(SEQ ID NO：2)；DFI2(SEQ ID NO：3)；DFI3(SEQ ID NO：4)；DFI4(SEQ ID NO：5)；LUTI(SEQID NO：6)