[发明专利]解淀粉芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明公开了一种解淀粉芽孢杆菌及制备植物病菌抗菌剂中的应用。解淀粉芽孢杆菌LM‑Y是从桃树患病植株根际土壤分离得到，与常见的生防真菌相比不产生致敏孢子，对人、畜、果蔬安全，对环境友好。本发明的解淀粉芽孢杆菌LM‑Y对桃褐腐病菌、小麦赤霉病菌、草莓灰霉病菌等多种病原菌具有显著的拮抗作用，其中对桃褐腐病菌的抑菌率达80％以上，抑菌率高出现有生防菌10％左右，具有较大的研发潜力。本发明的解淀粉芽孢杆菌LM‑Y菌剂对桃褐腐病有显著的防治效果，大田实验防治效果达78.5％，且生产工艺简单，在植物病害的生物防治中具有十分广阔的应用前景。

(一)技术领域

本发明涉及一种解淀粉芽孢杆菌及其应用，尤其涉及一种解淀粉芽孢杆菌及其在桃褐腐病生防中的应用。

(二)背景技术

桃褐腐病又名菌核病、果腐病、实腐病，引起桃褐腐病的病原菌是半知菌亚门丛梗孢科果丛梗孢(Monilinia fructicola)和仁果丛梗孢(Monilinia fructigena)、灰丛梗孢菌(Monilinia laxa)。此病是一种世界性分布的病害，可寄生在桃、杏、李、樱桃、梅等核果类果树上，引起果腐、花腐和叶枯。桃褐腐病在春季开花展叶期如遇低温多雨，可引起严重的花腐和叶枯；在生长后期如遇多雨潮湿天气，可引起果腐，使果实丧失经济价值。目前，生产中桃褐腐病的防治仍然以化学防治为主，但防效不甚理想，而且长期使用化学杀菌剂不但会导致病菌对其产生抗药性，而且果蔬产品上残留农药也会对公众健康造成威胁和环境污染。因此，寻找防治桃褐腐病的拮抗微生物具有重要意义。

目前，已经筛选到了一些有关解淀粉芽孢杆菌的的文献报道和专利。例如，申请号为201510789366.6公开了“一种解淀粉芽孢杆菌及其在玉米大斑病菌生防中的作用”，利用解淀粉芽孢杆菌D3制备菌剂，喷施于玉米叶片上使其定植，可抑制玉米大斑病菌。申请号201510462700.7公开了“一种解淀粉芽孢杆菌及其应用”，报道解淀粉芽孢杆菌XK-2对西瓜枯萎病菌、水稻纹枯病菌、核桃根腐病菌等多种病原菌具有显著的拮抗作用。但现有的能够抑制桃褐腐的微生物种类较少且拮抗作用还不够理想，包括上述专利公开的生防菌，因此需要筛选定植能力和拮抗作用更强的生防菌，以使生物防治方法能够更好的满足农业生产中防治桃褐腐病的要求。

(三)发明内容

本发明目的是提供一株解淀粉芽孢杆菌及其应用，该解淀粉芽孢杆菌对桃褐腐病菌的抑菌率达80.65％，大田防治效果高达86.5％，生防效果高出普通生防菌10％左右。另外，对小麦赤霉病菌、草莓灰霉病菌等多种病原菌具有显著的拮抗作用，适用范围广。

本发明采用的技术方案是：

本发明提供一株新菌株-解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)LM-Y，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No.13542，保藏日期为2017年1月6日，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101。

本发明还提供一种所述解淀粉芽孢杆菌LM-Y在制备植物病菌抗菌剂中的应用，所述植物病菌为桃褐腐病菌、小麦赤霉病菌或草莓灰霉病菌。

进一步，所述抗菌剂含有解淀粉芽孢杆菌LM-Y经发酵培养获得的发酵液。

进一步，所述抗菌剂按如下方法制备：(1)将解淀粉芽孢杆菌LM-Y接种于牛肉膏蛋白胨培养基，于30℃下培养24h，获得活化菌株；牛肉膏蛋白胨培养基组成：牛肉膏3g/L，蛋白胨5g/L，NaCl 3g/L，琼脂20g/L，溶剂为水，pH 7.2～7.4；

(2)将步骤(1)活化菌株接入LB液体培养基中，于30℃、180r/min振荡培养24h，获得种子液；所述LB液体培养基组成：蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，酵母膏10g/L，溶剂为水，pH值7.0；