[发明专利]两种抗HER2抗体-毛壳素偶联物及其制备方法和抗肿瘤应用

说明书

本发明涉及生物技术和药物领域，具体是两种抗HER2抗体‑毛壳素偶联物Trastuzumab‑vc‑Chaetocin(T‑L‑C)和Pertuzumab‑vc‑Chaetocin(P‑L‑C)及其合成制备方法和应用。所述抗体偶联物由带连接基的药物分子和单克隆抗体偶联得到，结构如下所示。本发明还提供了一种带连接基药物分子的制备方法。本发明制备的抗体偶联物对HER2阳性细胞具有靶向作用，既可以增强对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤，也可减少(+)‑Chaetocin单独给药产生的毒副作用，对HER2阳性表达的肿瘤细胞引起的癌症有巨大潜在治疗应用价值。

技术领域

本发明涉及生物技术和药物领域，具体地说，是两种抗HER2抗体-毛壳素偶联物及其制备方法和抗肿瘤方面应用。

背景技术

人表皮生长因子受体2(HER2)是具有酪氨酸激酶活性的表皮生长因子受体家族的一个成员。受体的聚合作用会导致受体酪氨酸残基的磷酸化，并启动多种信号通路导致细胞增殖和肿瘤发生，主要在乳腺癌中高度表达。HER2基因的过表达不仅与肿瘤的发生发展相关外，还是一个重要的临床治疗监测及预后指标，并且是肿瘤靶向治疗药物选择的一个重要靶点。对于该靶点的研究相对成熟，且已有针对该基因过度表达的药物赫赛汀(Herceptin)即曲妥珠单抗Trastuzumab。

曲妥珠单抗是一种重组DNA衍生的人源化单克隆抗体，可选择性地作用于人表皮生长因子受体-2(HER2)的细胞外部位，阻断信号通路，抑制肿瘤细胞的生长，赫赛汀还可以刺激自身的免疫细胞去摧毁癌细胞，仅对HER2高表达的肿瘤有效。帕妥珠单抗也是一种通过生物技术方法生产的人源化单克隆抗体，通过结合HER2，阻滞HER2与其它HER受体的杂二聚，抑制了与肿瘤生长相关的下游信号传导过程；与曲妥珠单抗所结合的表位不同，对低、中表达HER2的肿瘤也有效。

多硫代二酮哌嗪(Epipolythiodioxopiperazines，ETPs)是一类主要由海洋真菌产生的重要活性次级代谢产物，其结构特征为二酮哌嗪母核中含有硫桥。ETPs具有广泛的生物活性，例如抗增殖、细胞毒、免疫抑制、抗病毒以及抗菌等，其中多种化合物更是展示出很高抗肿瘤活性。毛壳素(+)-Chaetocin是ETP领域一个“明星分子”，最早被发现于海洋真菌Chaetronium minutum的代谢产物中，近年来科学家围绕该分子的抗肿瘤活性进行了大量研究，显示该化合物具有组蛋白赖氨酸特异性甲基转移酶(HKMTs)抑制作用，可强烈抑制肿瘤细胞的生长。(+)-Chaetocin的良好活性与其本身具有的二硫键也有较大关系，可能能够以类似烷化剂的作用方式修饰靶细胞蛋白，阻断诸多细胞通路进而导致肿瘤细胞死亡。

抗体偶联药物是由单克隆抗体(mAb)和强效毒性药物通过生物活性连接器(Linker)偶联而成，它兼具了化学药物和抗体药物各自的优点，通过高效特异的抗原抗体反应，携带抗肿瘤药物直达靶标，抗体内吞进入细胞，在溶酶体内再进一步降解并释放药物达到杀伤肿瘤细胞的目的。

细胞毒性药物用作ADCs药物的弹头，承担杀伤肿瘤细胞、发挥ADCs疗效的主要功能，是ADCs的重要组成部分。近年来临床中候选药物弹头高度集中于海兔毒素，美登素等药物，寻找出新的药物弹头对ADCs药物的发展推进有重要的意义，而海洋天然产物是抗肿瘤活性物质的重要来源，具有很高的研究和开发价值，且目前尚无关于将Trastuzumab和Pertuzumab与其他海洋毒素偶联，来治疗HER2介导的疾病的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供两种抗HER2抗体-毛壳素偶联物及其制备方法和抗肿瘤方面应用。

本发明的第一方面，提供两种抗HER2抗体-毛壳素偶联物(T-L-C或P-L-C)，其结构式如下所示：

其中，mAb指曲妥珠单抗Trastuzumab或帕妥珠单抗Pertuzumab，经蛋白酶敏感型缬氨酸-瓜氨酸连接基(vc)与海洋毒素毛壳素(+)-Chaetocin连接。