[发明专利]检测样品中目标物的预处理方法及检测样品中目标物的方法

权利要求书

1.一种检测奶酪制品中目标物的方法，其特征在于，包括：

(1)准确称量10g奶酪样品置于超低温冷冻瓶内，连接好样品口，开启超低温冷冻仪器，使冷冻瓶内奶酪在10分钟内冷却至-180℃，并保持2小时，得到预处理产物；

(2)将所述预处理产物进行除蛋白质及脂肪处理，得到第一处理液；

(3)移取20mL所述第一处理液于100mL小烧杯中，加入5mL含有2mol/L盐酸的缓冲溶液，摇匀，倒入镉柱顶部的贮液杯中，以小于6mL/min的流速过柱，过柱后的洗提液接入100mL容量瓶中，当贮液杯快要排空时，用15mL水冲洗小烧杯，再倒入贮液杯中，冲洗水流完后，再用15mL水重复一次，当第二次冲洗水快流尽时，将贮液杯装满水，以最大流速过柱，当容量瓶中的洗提液接近100mL时，取出容量瓶，用水定容，混匀；

(4)分别移取20mL步骤(2)所得第一处理液和20mL步骤(3)所得洗提液于100mL容量瓶中，分别进行如下操作：

在每个所述容量瓶中加水至60mL，然后先加入6mL显色液1，所述显色液1选自体积比为450：550的水-盐酸溶液，边加边混；再加入5mL显色液2，所述显色液2选自5g/L的磺胺溶液，混合，在室温下静置5min，避免直射阳光；加入2mL显色液3，所述显色液3选自1g/L的N-1-萘基-乙二胺二盐酸盐溶液，混合，在室温下静置5min，避免直射阳光；用水定容至刻度，混匀；在15min内用538nm波长，以空白试验液体为对照测定样品溶液的吸光度；

(5)分别移取0mL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL、12mL、16mL和20mL亚硝酸钠标准溶液于9个100mL容量瓶中，分别进行如下操作：

在每个所述容量瓶中加水至60mL，然后先加入6mL所述显色液1，边加边混；再加入5mL所述显色液2，混合，在室温下静置5min，避免直射阳光；加入2mL所述显色液3，小心混合，在室温下静置5min，避免直射阳光；用水定容至刻度，混匀；在15min内，用538nm波长，以不含亚硝酸钠的第一个溶液为对照测定另外八个溶液的吸光度；将测得的吸光度对亚硝酸根质量浓度作图；亚硝酸根的质量浓度可根据加入的亚硝酸钠标准溶液的量计算出；亚硝酸根的质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标；亚硝酸根的质量浓度以μg/100mL表示；

以硝酸根计，硝酸盐含量计算公式如下：

X＝1.35×[100000×c₂/(m×V₂)-W(NO₂^-)]

式中：

X——样品中硝酸根含量，单位为mg/kg；

c₂——根据步骤(3)所得洗提液的吸光度，从标准曲线上读取的亚硝酸根离子浓度，单位为微克每百毫升；

m——样品的质量，单位为克；

V₂——所取所述洗提液的体积，单位为毫升；

W(NO₂^-)——根据下式计算出的亚硝酸根含量：

X＝20000×c₁/(m×V₁)

式中：

X——样品中亚硝酸根含量，单位为毫克每千克；

c₁——根据步骤(2)所得第一处理液的吸光度，从标准曲线上读取的NO₂^-的浓度，单位为微克每百毫升；

m——样品的质量，单位为克；

V₁——所取所述第一处理液的体积，单位为毫升。