[发明专利]一种纳米载药系统(DOX-RGD-BSA@AuNCs)药物传递和生物成像

权利要求书

1.一种用于药物传递的纳米载药系统DOX-RGD-BSA@AuNCs的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1，金纳米簇AuNCs@BSA的制备方法：

步骤1.1，量取质量分数为1％的氯金酸溶液1.7mL，加入3.3mL去离子水，得到5mL10mM的氯金酸溶液；

步骤1.2，称取250mgBSA，溶解在5mL去离子水中，得到5mL50mg/mL的BSA溶液；

步骤1.3，称取20mgNaOH，溶解在0.5mL去离子水中，得到1MNaOH溶液；

步骤1.4，将配制好的氯金酸溶液加入到BSA溶液中，控温37℃，剧烈搅拌5min；

步骤1.5，将1MNaOH水溶液加入到上述混合溶液中，并且持续剧烈搅拌上述反应物，控温37℃，持续时间12～24h；

步骤1.6，将步骤1.5得到的产物冷却至室温，装进MWCO100000透析袋中，透析外液用水，维持外界温度4℃，透析12～24h，并用葡萄糖凝胶过柱，以除去多余的BSA，从而得到金纳米簇；

步骤2，RGD-BSA@AuNCs的制备方法：

步骤2.1，取2mL金纳米簇加入到8mLpH7.4、20mM的PBS缓冲溶液中，得到金纳米簇溶液；

步骤2.2，取4mL金纳米簇溶液，在其中加入15～30mg的EDC，避光条件室温下反应20min；

步骤2.3，加入15～20mg的NHS，在避光条件下剧烈搅拌1h，得到混合液；

步骤2.4，向上述混合液中加入100uL10mg/mL的c(RGD)fk溶液，室温下搅拌反应12～24h；

步骤2.5，反应后，将反应溶液装进MWCO100000透析袋中，透析外液为水，维持外界温度4℃，透析12～24h，并且反应产物用截留量为10kDa的超滤离心管在离心力3000Xg下离心20min，去除过量反应物，得到的产物溶于2mLPBS缓冲溶液中，且放置在4℃的冰箱内部保存，得到RGD-BSA@AuNCs；

步骤3，DOX-RGD-BSA@AuNCs的制备方法：

步骤3.1，将制得的RGD-BSA-AuNCs和1.5mg的SPDP加入到含有1mMEDTA的PBS缓冲溶液中，室温下反应4h，得到的反应产物装进MWCO100000透析袋中，透析外液为水，维持外界温度4℃，透析12～24h，得到活化的RGD-BSA@AuNCs；

步骤3.2，将含有1.5mg2.6×10^-6mol的盐酸阿霉素和0.36mg0.36×10^-6mol的2-亚氨基硫烷盐酸盐的混合物加入到含有1mMEDTA的PBS缓冲液中，室温下反应4h，得到巯基修饰的盐酸阿霉素DOX-SH；

步骤3.3，将过量的DOX-SH和活化的RGD-BSA@AuNCs反应，得到DOX-RGD-BSA@AuNCs溶液；

步骤3.4，将步骤3.3中的DOX-RGD-BSA@AuNCs溶液加入到PBS缓冲溶液中，然后装进MWCO100000透析袋中，透析外液用水，维持外界温度4℃，透析12～24h，得到DOX-RGD-BSA@AuNCs。

2.根据权利要求1所述的一种用于药物传递的纳米载药系统DOX-RGD-BSA@AuNCs的制备方法，其特征在于，步骤1.5中，反应溶液的PH为12，并且在37℃下反应24h。

3.根据权利要求1所述的一种用于药物传递的纳米载药系统DOX-RGD-BSA@AuNCs的制备方法，其特征在于，步骤2.4中，c(RGD)fk溶液的浓度为10mg/mL，并且在室温下搅拌反应24h。

4.根据权利要求1所述的一种用于药物传递的纳米载药系统DOX-RGD-BSA@AuNCs的制备方法，其特征在于，步骤3.2中，盐酸阿霉素和2-亚氨基硫烷盐酸盐按照1:1的摩尔比反应4小时。