[发明专利]分子标志物MK2基因及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及肿瘤的分子诊断领域，更具体地，本发明涉及骨髓瘤细胞中的分子标志物MK2基因及其在制备诊断多发性骨髓瘤的产品中的应用。

背景技术

多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一种浆细胞恶性肿瘤，其特点是骨髓中浆细胞克隆性增殖，并分泌单克隆免疫球蛋白或轻链。由于异常浆细胞浸润骨骼、骨髓和全身多个器官组织，引起病理性的骨骼破坏，患者的血清中出现异常的单克隆免疫球蛋白，从而抑制了机体的正常的多克隆免疫球蛋白，患者的尿内出现蛋白，患者最后表现出导致贫血、肾功能损害及病理性骨折等。MM是全世界发病率排名第二位的血液肿瘤，当前我国50岁以上的肿瘤病人中MM患者大约占据3％左右，随着我国人口的老龄化，MM发病率以每年1％的速度上升。目前认为MM发生是一个逐步进展的过程，很多患者在早期发生意义不明的单克隆球蛋白症，然后进展为MM，部分患者最终发展为髓外骨髓瘤(浆细胞白血病)，整个过程中患者骨髓浆细胞伴有多种基因的突变。

目前多发性骨髓瘤的诊断主要依靠骨髓克隆性浆细胞比例和(或)活组织病理学检查作为MM诊断基础。国际骨髓瘤工作组(IMWG)于2014年修订了意义未明的单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)、MM诊断标准。MM诊断标准包括骨髓中克隆性浆细胞比例≥10％和/或活组织病理学检查证实为浆细胞瘤；同时伴有以下一种或多种情况：高钙血症、肾功能不全、贫血和溶骨性骨损害。单克隆免疫球蛋白(M蛋白)是临床常用的MM诊断标志物，但修订后的诊断标准强调M蛋白不是诊断MM的必备条件，但可用来区别分泌型或非分泌型MM。此外，MRI、低剂量全身CT、FDG/PET及PET/CT等现代影像学技术被纳入检查辅助方法。

目前多发性骨髓瘤诊断的方法复杂、检查项目多，缺少一种可靠、方便的临床诊断方法。近年来，本课题组基于基因芯片表达谱，发现在多发性骨髓瘤患者中，MK2基因的表达显著增高，MK2基因的表达水平与与多发性骨髓瘤患者病理进程及耐药性密切相关。表明MK2是一种高危的骨髓瘤基因，可为多发性骨髓瘤的临床诊断提供可靠的判断。

MK2(mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 2，MAPKAPK2)是于1992年发现并被纯化的第一个MAPK激活蛋白激酶，主要被p38蛋白激酶直接磷酸化激活，是p38蛋白激酶的重要底物，在介导胞外信号引起的细胞增殖、分化、衰老、凋亡及炎症等反应中起着重要作用。MK2为致癌基因，可通过磷酸化途径直接活化多种肿瘤相关因子如细胞分裂周期蛋白25B/C和热休克蛋白27等；其亦可通过转录后调控机制上调多个癌基因和促炎因子的表达，而促进肿瘤包括肺癌的发生发展；MK2过表达可活化LIM激酶而激活VEGF诱导的血管生成过程，从而促进肿瘤的侵袭和转移。

发明内容

解决的技术问题：本发明的目的在于提供一种分子标志物MK2基因及其在制备诊断多发性骨髓瘤的产品中的应用。

技术方案：分子标志物MK2基因，序列如SEQ ID NO.1所示。

分子标志物MK2蛋白，序列如SEQ ID NO.2所示。

分子标志物MK2基因在制备诊断多发性骨髓瘤的产品中的应用。

上述产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫组化、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测MK2基因表达水平以诊断多发性骨髓瘤的产品。

上述用实时定量PCR诊断多发性骨髓瘤的产品至少包括一对特异扩增MK2基因的引物；所述用免疫组化诊断多发性骨髓瘤的产品包括：与MK2蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断多发性骨髓瘤的产品包括：与MK2基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断多发性骨髓瘤的产品包括：蛋白芯片和基因芯片，其中蛋白芯片包括与MK2蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与MK2基因的核酸序列杂交的探针。

上述用实时定量PCR诊断多发性骨髓瘤的产品至少包括一对特异扩增MK2基因的引物，序列如：SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。

一种用于诊断多发性骨髓瘤的工具，该工具能够检测样本中MK2基因的表达。

上述工具包括芯片、试剂盒、试纸或高通量测序平台。