[发明专利]一种在保卫细胞专一表达启动子及其创建方法

权利要求书

1.一种在保卫细胞专一表达启动子，其特征在于，其核酸序列为SEQ NO ID.1。

2.如权利要求1所述的在保卫细胞专一表达启动子的创建方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1设计一对特异性引物：

上游引物：5′-CACAAGCTTCACCCACTTTTCTTCCTCT-3′；

下游引物：5′-GTCTCTAGAAGTGGCGAGTTGTGGTT-3′；

S2利用PCR技术将ABA应答元件从Dc3启动子中扩增出来；

S3设计另一对引物：

上游引物：5′-CACTCTAGAAGTAGGCAAGTAGCAATGTC-3′；

下游引物：5′-TTCCCCCGGGTATTATATATTGCTGCTTC-3′；

S4利用PCR技术将保卫细胞专一性表达元件从kst1启动子中扩增出来；

S5将步骤S2和步骤S4中得到的PCR扩增产物先连接到T-easy载体上测序，确认后先将植物表达载体pBI121和步骤S2中得到的PCR扩增产物用HindIII和XbaI酶切，分别回收pBI121的大片段和目的片段，之后再用连接酶进行连接,然后将得到的连接产物和步骤S4中得到的PCR扩增产物用XbaI和SmaI酶切，分别回收所述连接产物的大片段和目的片段，之后再用连接酶进行连接，这样创建的受逆境胁迫诱导的保卫细胞专一性表达的启动子就构建到含有GUS报告基因的植物表达载体pBI121上。