[发明专利]具有ACE抑制功能的牦牛骨蛋白肽及制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种具有ACE抑制功能的牦牛骨蛋白肽及制备方法和应用。所述牦牛骨蛋白肽为牦牛骨蛋白经过复合蛋白酶分步酶解的酶解物制得；所述复合蛋白酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶。本发明所述的牦牛骨蛋白肽具有优异的ACE抑制功能，ACE抑制活性(IC50值)小于0.32mg/mL，可以作为ACE抑制剂应用于特需食品和营养食品中。本发明的牦牛骨蛋白肽制备方法简单，整个加工过程中没有添加酸或碱进行pH的调整，产品保持较好的功能特性，较易实现产业化生产。

技术领域

本发明涉及动物食品加工领域，更具体地，涉及一种具有ACE抑制功能的牦牛骨蛋白肽及制备方法和应用。

背景技术

高血压是对人类健康危害极大的一种疾病，潜伏期长。高血压的早期阶段，一般没有明显不适症，直至发生临床迹象心脏病发作、脑血管破裂而导致死亡。

血管紧张素转化酶(Angiotensin I converting enzyme，ACE)为肾素-血管紧张素系统的关键酶。血管紧张素原在肾素的作用下转化为血管紧张素I，血管紧张素I在ACE的作用下转化为血管紧张素II，刺激血管收缩，造成血压上升。抑制ACE的活性对降低血压有着积极的作用，因而开发有效的ACE抑制剂引起人们的极大关注。虽然来源于食物的ACE抑制肽比人工合成的ACE抑制剂作用弱，但是它有其独特的优点，不会产生降压过度的问题，安全性高，无副作用，除降压功能外，往往同时具有免疫促进、易消化吸收等功能。由于药物疗法存在副作用，天然食物中的降血压功能因子的开发利用将成为今后高血压非药物治疗的重要部分。

现有技术中有利用鱼类资源或蛤类制备ACE抑制肽的方法，如中国专利CN106399435A公开了一种利用鱼鳞制备ACE抑制肽的方法，该方法包括将鱼鳞水洗去杂质后，用NaCl溶液浸泡1-2天，脱除杂蛋白和鱼银粉，将鱼鳞捞出后再用HCl溶液、料液比1:10-1:20，浸泡1-2h，以脱除钙盐等无机盐；将鱼鳞用蒸馏水浸泡溶胀，接着用碱性蛋白酶酶解，然后离心，上清液为酶解液，将酶解液冷冻干燥得到ACE抑制肽；所得到的产品ACE抑制率较高，与化学合成的ACE抑制肽相比，制备的ACE抑制肽安全无毒、易于消化；如中国专利CN104593466A公开了一种利用内源酶制备蓝蛤蛋白源ACE抑制肽的方法，该方法利用蓝蛤体内的内源性蛋白酶进行酶解，通过自溶获得天然ACE抑制肽，制备过程中不加入任何外源蛋白酶，整个制备过程包括新鲜蓝蛤预处理、匀浆、内源酶激活、酶争、灭酶、脱腥、离心、冷冻干燥；也有报道采用罗非鱼鱼皮及植物蛋白为原料生产ACE抑制肽，如中国专利CN101240312A公开了一种源于鱼皮的ACE抑制肽的制备方法，该方法实现罗非鱼废弃物的综合利用，具体以罗非鱼鱼皮为原料，水提罗非鱼鱼皮中的鱼皮蛋白，采用蛋白酶进行水解，经灭酶、脱苦、脱色、脱味、过滤、离子交换和浓缩等工序得到鱼皮蛋白酶解液(TSP-1)，将TSP-1超滤处理后，再经凝胶层收集高活性组分，冷冻干燥制得高活性的ACE抑制肽产品；中国专利CN104131055A公开了一种藻红蛋白ACE抑制肽的制备方法，该方法包括藻红蛋白的提取步骤，加入胃蛋白酶酶解再加入胰蛋白酶酶解；将酶解后的冻干粉溶于纯水，上样于SephadexG-15凝胶柱，收集活性最高峰为藻红蛋白ACE抑制组分。将所述组分继续上样于高效液相色谱ZORBAX300SB-C18柱进行分离，以检测该组分中藻红蛋白ACE抑制肽制备，该发明的方法可以避免活性肽经人体摄入后被胃肠道消化液降解而失活，同时缩减了成本。

但这些制备方法中通常采用通过添加酸、碱调节pH,影响产品的品质，同时对蛋白肽的主要组成不明确。我国牦牛骨资源丰富，目前国内外专利中未见利用牦牛骨蛋白资源制备血管紧张素转化酶抑制肽的专利文献报道。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种具有ACE抑制功能的牦牛骨蛋白肽及其制备方法和应用。

为了实现本发明的目的，本发明一方面提供了一种具有ACE抑制功能的牦牛骨蛋白肽，该牦牛骨蛋白肽为牦牛骨蛋白经过复合蛋白酶分步酶解的酶解物制得；其中，复合蛋白酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶。