[发明专利]一种高强度曲率胶原膜的制备方法

说明书

本发明涉及胶原膜，公开了一种高强度曲率胶原膜的制备方法，包括如下步骤：S1：将胶原溶液制作成胶原凝胶；S2：将步骤S1制作的胶原凝胶置于环形固定环中；S3：将环形固定环连同其中的胶原凝胶置于下模具上，后利用上模具对胶原凝胶进行压缩；所述下模具包括具有曲率的凹陷部，所述上模具包括具有曲率的与凹陷部相适应的突出部，通过突出部和凹陷部的相配合实现对胶原凝胶的压缩；S4：压缩完成后，取下下模具，对附着在上模具上的胶原膜进行吹干，即得高强度曲率胶原膜。本发明通过压缩胶原凝胶的方法，快速排出了水分，节省了制作时间，制备的曲率胶原膜强度高，能与曲面的角膜很好的契合，提高角膜损伤修复的效率，而且不会影响角膜的屈光性。

技术领域

本发明涉及胶原膜，尤其涉及一种高强度曲率胶原膜的制备方法。

背景技术

细胞外基质是生物体不可缺少的一部分，它的作用是把各种组织细胞聚集在一起，形成一个有机整体，同时也维持细胞成长的微环境。在人体中，细胞外基质就起到了维持皮肤、骨头、角膜、肌腱、牙齿、软骨等组织器官完整性的作用。而胶原作为细胞外基质最主要的结构蛋白，在生物体内具有十分重要的作用。胶原在细胞外基质的含量较高，这样才能负担比较大的机械强度。

胶原作为细胞外基质的一种，具有极好的生物相容性。胶原膜是一种很好的组织工程工具，它具有坚韧、透明、组织相容性好等特点，可以作为细胞片载体，对组织器官损伤进行修复。平面的胶原膜可以较好的修复一些损伤，不过某些具有特殊形状的器官，如角膜，平面的膜就不能与曲面的角膜很好地契合，使细胞移植效率大大降低。而与角膜曲率一致的胶原膜就能完美的与角膜相契合，与平面胶原膜相比，有曲率的胶原膜提高了角膜损伤修复的效率，而且不会影响角膜的屈光性。

平面胶原膜CV（collagen vitrigel），是一种具有高生物相容性的薄膜。CV在组织工程的应用十分广泛，尤其是角膜的组织修复中。角膜上皮、基质和内皮细胞都可以通过CV载体进行移植。CV可以较好的修复一些损伤，不过某些具有特殊形状的器官，如角膜，平面的膜就不能与曲面的角膜很好地契合，使细胞移植效率大大降低。而与角膜曲率一致的胶原膜就能完美的与角膜相契合，与平面胶原膜相比，有曲率的胶原膜提高了角膜损伤修复的效率，而且不会影响角膜的屈光性。传统CV在角膜上应用比较受限制，这是因为CV是平面的，而角膜是有一定曲率的球面。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种高强度曲率胶原膜的制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下方案实现：

一种高强度曲率胶原膜的制备方法，包括如下步骤：

S1：将胶原溶液制作成胶原凝胶；

S2：将步骤S1制作的胶原凝胶置于环形固定环中；

S3：将环形固定环连同其中的胶原凝胶置于下模具上，后利用上模具对胶原凝胶进行压缩；所述下模具包括具有曲率的凹陷部，所述上模具包括具有曲率的与凹陷部相适应的突出部，通过突出部和凹陷部的相配合实现对胶原凝胶的压缩；

S4：压缩完成后，取下下模具，对附着在上模具上的胶原膜进行吹干，即得高强度曲率胶原膜。

通过压力变化压缩胶原凝胶的方法，快速排出水分，达到快速成型的目的，节省了制作时间，两小时内即可完成制作。

进一步的，步骤S1中，于胶原溶液中加入DMEM培养基进行震荡离心，对离心后的混合液进行冰浴，防止胶原凝胶凝结，后温育培养。具体的，步骤S1中，于2~10mg/ml的胶原溶液中加入10×DMEM（10倍浓度）培养基1ml，震荡混匀后离心，对离心后的混合液进行冰浴，防止胶原凝胶凝结，后温育培养。

上述方案中，温育培养的条件为：37℃的温度下温育30~60min。