[发明专利]大豆蛋白及其编码基因的应用及引物、表达载体和制备方法

说明书

本发明公开一种大豆蛋白及其编码基因的应用及引物、表达载体和制备方法，将所述大豆蛋白或其编码基因用于提高植物或大肠杆菌的耐盐性。其中，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma11g07260.1。该大豆蛋白可增强大肠杆菌的耐盐性，由于很多抗逆基因在大肠杆菌和植物体系具有相似的抗逆功能，因此，该大豆蛋白及其编码基因在植物抗逆领域具有潜在的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，主要涉及一种大豆蛋白及其编码基因的应用及引物、表达载体和制备方法。

背景技术

盐碱、干旱等非生物胁迫是限制植物生长发育的主要环境因子。这些环境因子导致植物体内发生一系列的生理代谢反应，表现为代谢和生长的可逆性抑制，严重时甚至引起不可逆伤害，导致整个植株死亡。因此，如何提高植物的抗逆功能，一直是人们研究的课题。

因此，现有技术还有待于改进和发展。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种大豆蛋白及其编码基因的应用及引物、表达载体和制备方法，该大豆蛋白的基因编码为Glyma11g07260.1，本发明中旨在提供一种该大豆蛋白在提高植物耐盐性中应用。

本发明的技术方案如下：

一种大豆蛋白的应用，其中，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma11g07260.1，将所述大豆蛋白用于提高植物或大肠杆菌的耐盐性。

一种大豆蛋白的编码基因的应用，其中，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma11g07260.1，将所述大豆蛋白的编码基因用于提高植物或大肠杆菌的耐盐性。

一种用于制备大豆蛋白或其编码基因的引物，其中，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma11g07260.1，引物的序列如下所示：

F：3’-ATGTTTCACTCAATCAAAACGG(Nde I)-5’；

R：3’-TTAATTGGCGCTGGTCTGGTG(Xho I)-5’。

一种用于提高耐盐性的表达载体，其中，所述表达载体为携带有SEQ IDNO.4所示的大豆蛋白基因，用于表达基因编码为Glyma11g07260.1的大豆蛋白。

所述的用于提高耐盐性的表达载体，其中，所述表达载体用PET-28a蛋白表达载体重组得到，该大豆蛋白基因通过酶切位点Nde I和Xho I连接在表达载体上。

一种用于提高耐盐性的表达载体的制备方法，其中，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma11g07260.1，其制备方法包括以下步骤：

扩增目的基因：以F：3’-ATGTTTCACTCAATCAAAAC GG-5’；R：3’-TTAATTGGCGCTGGTCTGGTG-5’作为引物，以大豆R0期胚根cDNA为模板，进行PCR扩增，得到目的基因片段，目的基因片段的基因序列如SEQ ID NO.4所示；

构建重组质粒：将目的基因片段与经Nde I和Xho I双酶切的蛋白表达载体PET-28a，通过T4连接酶连接酶切产物，构建pET-28a重组质粒。

所述的用于提高耐盐性的表达载体的制备方法，其中，构建重组质粒过程中，包括以下步骤：

将目的基因片段和经过双酶切的PET-28a蛋白表达载体按照摩尔比10:1混合，加入0.5μL T4连接酶，1μL 10×Buffer，用水补齐至10μL，16℃连接过夜。

有益效果：本发明中首次发现该蛋白可以提高大肠杆菌的耐盐性，对于其在植物抗逆工程上的应用具有指导意义。该大豆蛋白可增强大肠杆菌的耐盐性，由于很多抗逆基因在大肠杆菌和植物体系具有相似的抗逆功能，因此，该基因在植物抗逆领域具有潜在的应用前景。

附图说明