[发明专利]SYCE3在结直肠癌诊断和治疗效果评价中的应用

说明书

技术领域

本申请属于肿瘤治疗领域，涉及一种用于结直肠癌诊断和治疗效果评价的分子标志物。

背景技术

结直肠属中医学“肠积”、“积聚”、“症瘕”、“肠覃”、“肠风’等病的范畴。中医在晚期结直肠癌的综合治疗中占据着不可替代的位置，而辨证论治这一独特优势却存在较多的主观性，导致其准确性与临床医师的临床经验直接相关；若辨证失当则会降低疗效，甚至造成严重的不良后果。因而证的客观化是广大中医研究者必须面对的一个重要研究方向。

湿热内蕴证是结直肠癌最常见的单纯实证，是指由于湿热侵犯肠道，传导失职，表现为以泄泻下痢为主的证候。在三焦辨证中属下焦病证，多因夏秋之季，感受暑湿热邪，侵犯肠道，或饮食不洁，致使湿热秽浊之邪蕴结肠道而成。临床表现为：脘胀腹痛，下痢脓血，里急后重，或暴注下泻，色黄而秽臭，肛门灼热，身热，口渴，小便短黄，舌质红，苔黄腻，脉滑数。

中医“证”是机体在疾病发展过程中某一阶段病因病机的高度概括，反应该阶段病理变化的本质。既然同一个“证”，具有共同的临床表现和病理基础，那考虑其有共同的物质基础，而这种物质基础很有可能反映在基因水平上。基因表达水平的变化反映了机体特定阶段的生命特征，对疾病的诊断和临床分型等有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于结直肠癌诊断或治疗效果评价的分子标志物，所述分子标志物是SYCE3基因及其表达产物。该分子标志物的来源是血液，通过检测血液中的SYCE3来进行结直肠癌诊断或治疗效果评价具有以下优势：无创、快速、灵敏。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明提供了检测SYCE3的产品在制备湿热内蕴型晚期结直肠癌患者诊断或治疗效果评价工具中的应用。

进一步，所述检测SYCE3的产品包括检测样品中SYCE3基因表达量的产品。

更进一步，所述检测SYCE3的产品包括能够定量样品中SYCE3基因mRNA的产品，和/或能够定量样品中SYCE3蛋白的产品。

本发明的定量样品中SYCE3基因mRNA的产品可基于使用核酸分子的已知方法来发挥其功能：如PCR、如Southern杂交、Northern杂交、点杂交、荧光原位杂交(FISH)、DNA微阵列、ASO法、高通量测序平台等。使用该产品可以定性地、定量地、或半定量地实施分析。

包含在上述产品中的核酸可以通过化学合成来获得，或通过从生物材料制备含有期望核酸的基因，然后使用设计用于扩增期望核酸的引物扩增它来获得。

进一步，所述PCR方法为已知方法，例如，ARMS(Amplification Refractory Mutation System，扩增不应突变系统)法、RT-PCR(逆转录酶-PCR)法、嵌套PCR法等等。扩增的核酸可以通过使用点印迹杂交法、表面等离子共振法(SPR法)、PCR-RFLP法、原位RT-PCR法、PCR-SSO(序列特异性寡核苷酸)法、PCR-SSP法、AMPFLP(可扩增片段长度多态性)法、MVR-PCR法、和PCR-SSCP(单链构象多态性)法来检测。

在本发明的具体实施方案中，所述能够定量样品中SYCE3基因mRNA的试剂包括实时定量PCR中使用的特异扩增SYCE3基因的引物，所述引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

产品中包括的引物可以通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来适当地设计，并通过化学合成来制备。

上面所述的核酸还可包括探针，所述探针可以通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来恰当设计，并通过化学合成来制备，或者可以通过从生物材料制备含有期望核酸序列的基因，并使用设计用于扩增期望核酸序列的引物扩增它来制备。

本发明的定量样品中SYCE3蛋白的产品可基于使用抗体的已知方法来发挥其功能：例如，可以包括ELISA、放射免疫测定法、免疫组织化学法、Western印迹等。