[发明专利]一种利用亚临界水同时提取白花蛇舌草中熊果酸和齐墩果酸的方法

说明书

本发明公开一种利用亚临界水同时提取白花蛇舌草中熊果酸和齐墩果酸的方法，属于天然活性成分提取分离技术领域。以白花蛇舌草为原料，首先运用单因素试验法探究原料粒径、提取温度、提取时间、液料比和提取压力对熊果酸（UA）和齐墩果酸（OA）提取量的影响，再通过曲面响应法确定最佳的条件。收集提取液，通过旋转蒸发、石油醚脱脂工艺得到粗产品，最后，通过酸碱处理、大孔树脂吸附、旋转蒸发浓缩等技术得到熊果酸和齐墩果酸。本发明采用先进的亚临界水提取技术，具有提取时间短、效率高、环保无污染的优点，易于工业化生产。

技术领域

本发明涉及一种利用亚临界水同时提取白花蛇舌草中熊果酸和齐墩果酸的方法，属于天然活性成分提取分离技术领域。

背景技术

白花蛇舌草别名白花十字草、蛇舌癀、鹤舌草，为茜草科白花蛇舌草Hedyotisdiffusa 的全草，具有清热解毒、利尿消肿、活血止痛、抗菌消炎和抗肿瘤等功效。白花蛇舌草化学成分较为复杂，主要含三萜类、蒽醌、多糖、甾醇、黄酮等有机化合物，熊果酸和齐墩果酸是其中已知的主要活性物质，为同分异构体。药理学研究表面，熊果酸的药理作用主要表现在抗艾滋病、抗糖尿病、抗肿瘤以及抗氧化等方面（王鹏，张忠义，吴忠. 熊果酸在药用植物中的分布及药理作用 [J]. 中草药，2000，23（11）：717-722.），齐墩果酸具有护肝、解毒，抗肿瘤、抗氧化剂，抗胃溃疡，抗高血压，降血脂等多方面的临床药理作用（周志勇，袁丁. 齐墩果酸药理作用研究进展 [J]. 中国医院药学杂志，2008，288（23）：2031-2033.）。

目前白花蛇舌草中熊果酸和齐墩果酸的提取方法主要是采用溶剂提取法、超声波法、回流提取法、微波提取法等。例如，王培明等人（王培明，张少伟，刘军海. 白花蛇舌草中熊果酸微波辅助提取工艺研究 [J]. 农产品加工业，2010（8）：36-40.）应用微波辅助提取技术，乙醇浓度为85%、微波功率为400W、微波时间为5min、液料比为22∶1、微波温度为50℃，在此条件下熊果酸提取量为4.088mg/g。王欢等人（王欢，黄嫣，李希，等. 响应面法优化白花蛇舌草中齐墩果酸和熊果酸的提取工艺 [J]. 中国实验方剂学杂志，2015，21（20）：34-37.）利用回流提取技术，提取工艺为料液比1∶10.5，提取2次，每次92min，得到齐墩果酸和熊果酸平均提取量分别为0.4976mg/g和2.0364mg/g。虽然这些提取方法提取率较高，但回流提取法时间较长、微波提取法成本较高，很难实现工业化应用。

为了避免现有提取方法的问题，本专利采用新兴的亚临界水提取技术。亚临界水又称高压热水，是指将水加热至沸点以上，临界点以下，并控制系统压力使水保持为液态。当水达到亚临界状态时，水极性降低，类似于有机溶剂，可以用来提取弱极性或非极性的成分。同文献报道的提取方法相比，亚临界水提取效率高、成本低且无污染，非常适用于工业化大规模生产。利用亚临界水提取白花蛇舌草中熊果酸和齐墩果酸，是一种绿色萃取技术，目前尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种前处理简单，提取溶剂绿色环保，适应工业生产的亚临界水提取白花蛇舌草中熊果酸和齐墩果酸的方法，最后对提取的熊果酸和齐墩果酸进行纯化，同时又能保持有效成分结构与抗氧化活性。

本发明提供一种利用亚临界水同时提取白花蛇舌草中熊果酸和齐墩果酸的方法，包括以下步骤；

（1）以白花蛇舌草为原料，粉碎并烘干，过筛得到不同粒径的原料粉末；

（2）采用亚临界水法提取白花蛇舌草中的熊果酸和齐墩果酸，称取步骤（1）中所述原料粉末，按一定液料比加入去离子水，置于内含聚四氟乙烯的反应釜中，120 ℃～200 ℃下反应一段时间，反应结束后，迅速冷却反应液至室温，离心分离，收集沉淀，向沉淀中加入一定体积的95%乙醇，震荡混合一段时间，离心，收集上清液；