[发明专利]一种具有广谱抗菌活性的绿针假单胞菌及其应用

说明书

本发明涉及一种具有广谱抗菌活性的绿针假单胞菌，以及该菌株在果树及大田作物病害防治中的应用，属于生物技术领域。一种具有广谱抗菌活性的绿针假单胞菌，分类命名为绿针假单胞菌（Pseudomonas chlororaphis），株号为YTBTa14，保藏编号为CCTCC NO:M 2016099，16S rDNA序列如序列表所示。本发明具有广谱抗菌活性的绿针假单胞菌，其菌体和发酵液均具有较强的广谱的果树真菌病害抗菌活性，且抗菌效果持久、稳定，具备从中开发出新型、高效、广谱生防杀菌剂的巨大潜力，为微生物应用于生物防治的开发提供了新的途径。

技术领域

本发明涉及一种具有广谱抗菌活性的绿针假单胞菌，以及该菌株在果树及大田作物病害防治中的应用，属于生物技术领域。

背景技术

小麦、果树是世界上重要的经济作物，常年受到多种病害的危害，每年因病害造成的经济损失难以估计。目前农药是防控病虫害的最有效手段之一，但是因化学农药的广泛使用而引起的各种问题也随之而来，如农药残留、环境污染、病虫害抗药性的产生等，不利于农业的可持续发展。因此，禁止和限制大量高毒、高残留农药的使用，开发和使用生物源农药已成为保护环境和促进农业发展的重要研究课题。

生物防治是指利用生物及其代谢产物防治植物病虫害方法。它的实质就是利用生物种间关系、种内关系，调节有害生物种群密度，即生物群防治生物群。与传统的防治技术相比，生物防治技术具有不污染环境、对人和其他生物安全、产品无残留、易于同其他植物保护措施协调配合并能节约能源等优点，必将在有害生物综合防治中发挥着越来越重要的作用。到目前为止，真菌、细菌、放线菌、酵母菌都可用于生物防治。利用细菌防治有害微生物是开发和利用微生物资源的重要研究领域之一，亦是最具有潜力、应用前景最为广阔的有效途径之一。细菌防治优势主要有以下几点：一是繁殖速度快、培养成本低廉；二是对病原菌的作用方式较广，如细菌素、抗生素、胞外裂解酶、脂肽类等多种形式，三是有些细菌具有防病阻生的双重作用。

近年来，生物防治迅速发展，其中假单胞菌在植物病虫害防治中发挥了非常重要的作用。主要通过营养竞争、分泌降解微生物的酶及抗生作用等实现其生物防治作用。在我国，绿针假单胞菌主要用于多种蔬菜作物病原真菌、细菌引起的病害的有效防治，而针对果树及大田作物真菌病害的绿针假单胞菌未见报道。目前，研究者通过大量试验筛选到能够拮抗多种果树、病原真菌的绿针假单胞菌株，并初步取得显著成效。

发明内容

本发明的目的是针对果树及大田作物病害的生物防治，尤其是苹果轮纹病、樱桃疫病、葡萄炭疽病、葡萄白腐病、葡萄霜霉病、小麦纹枯病，提供了一种具有广谱抗菌活性的绿针假单胞菌及其应用，其菌体和发酵液对于多种果树病害及大田作物病害具有较好的防治效果。

一种具有广谱抗菌活性的绿针假单胞菌，分类命名为绿针假单胞 菌(Pseudomonas chlororaphis)，株号为YTBTa14，已于2016年3 月8日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称为CCTCC，地址为中国 武汉武汉大学)，保藏编号为CCTCC NO:M 2016099，16S rDNA序 列如序列表所示。

所述的绿针假单胞菌的形态特征为：菌体为杆状，0.3μm ～ 0.8μm×1.0μm ～1.1μm，革兰氏染色阴性，无芽孢，单极生鞭毛，能运动，在 KMB 培养基上培养 24h 后可形成1.2mm 菌落，菌落可产生橙色色素，圆形，表面凸起，光滑，较粘稠，易挑起，边缘整齐。

所述的绿针假单胞菌的生理生化特征为：能产生荧光色素，能水解精氨酸双水解酶、脂酶、氧化酶、过氧化氢酶、柠檬酸盐、明胶，不水解淀粉，也不产生 H2S，都不能利用聚β-羟基丁酸盐作碳源。最适培养温度为 28℃～ 30℃，最适生长 pH 值为 7.0 ～ 7.5，可产生橙色非荧光色素，能利用卵磷脂酶，可把蔗糖转化为果聚糖，不产生脓青素，也不进行反硝化作用。