[发明专利]用于评估肝癌患者治疗效果的免疫荧光检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种用于评估肝癌患者治疗效果的免疫荧光检测试剂盒，具体涉及一种用于评估肝细胞肝癌患者接受索拉非尼治疗的效果的双抗体检测试剂盒。

背景技术

肝细胞癌肝癌(简称肝癌)是最常见的恶性肿瘤之一，死亡人数居我国恶性肿瘤第三位。肝癌预后极差，大部分患者在诊断时已失去手术机会，原因是肝癌极易发生肝内或肝外转移。肝癌血管生成丰富，血行转移是导致肝癌易于转移和复发的重要原因，因此抑制血管生成被认为是治疗肝癌的重要策略。索拉非尼是全球首个获准用于治疗肝癌的抗血管生成药物，也是目前唯一经研究证实可以延长肝癌患者生存的分子靶向药物，然而索拉非尼治疗肝癌的疾病控制率仅为42-62％，重要原因是目前缺乏明确的指标可筛选该药物治疗的目标人群，患者仅能盲目接受索拉非尼治疗，对无效患者而言不仅延误病情发展，还造成巨额的经济损失和医疗资源的浪费。

目前临床尚无可用于判断肝癌患者接受索拉非尼治疗效果的分子标志物或者检测试剂盒。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于评估肝癌患者治疗效果的免疫荧光检测试剂盒，该试剂盒采用双抗体结合的判断指标，具有客观准确、简便、直观、易于重复等特点，可以有效评估肝癌患者服用索拉非尼的治疗效果，可用于筛选适用索拉非尼进行治疗的肝癌患者，从而更好地帮助医生选择合适的治疗人群，帮助提高治疗效果和延长患者生存时间。

本发明所述的用于评估肝癌患者治疗效果的免疫荧光检测试剂盒，包括第一抗体和第二抗体，所述第一抗体是选自对于以下蛋白分子标记物的抗体的组合：CD34(细胞分化抗原34)和CXCR4(C-X-C趋化因子受体4)。

优选地，所述第二抗体是具有荧光素酶标记的第二抗体。

通过本发明所述的免疫荧光检测试剂盒，对肝癌组织样本进行免疫荧光检测，综合分析上述两种第一抗体所特异性标记的蛋白分子标记物在样本中的表达水平，可以达到评估肝癌患者服用索拉非尼后的治疗效果。

本发明所述的免疫荧光检测试剂盒具有以下优点：

(1)试验方法非常成熟，检测过程简便，直观，易于重复，由普通技术员均可以完成；

(2)可采用人工辅助的半自动图像定量分析，结果客观准确，优于人工半定量分析。

附图说明

图1是免疫荧光方法检测肝癌组织中CXCR4阳性血管的结果图。图中，绿色荧光显示CD34分子，红色荧光显示CXCR4分子，黄色显示CXCR4阳性血管的分布。

图2是生存曲线分析图，显示肝癌患者服用索拉非尼治疗前，肿瘤组织中的CXCR4阳性血管的密度与服药后的总体生存情况的关系。

具体实施方式

实施例一：本发明所述的免疫荧光检测试剂盒的制备

本发明选用CD34抗原作为肿瘤组织中的总体血管内皮细胞标记，CXCR4抗原作为血管内皮顶端细胞标记，并利用免疫荧光双染技术标记出CXCR4与CD34抗原双阳性的血管内皮细胞。

表1：抗体的来源和具体实验条件