[发明专利]KPNA2基因的应用和抑制KPNA2基因表达的siRNA的应用

说明书

本发明提供了一种KPNA2基因的应用和抑制KPNA2基因表达的siRNA的应用，涉及医药基因工程的技术领域。本发明提供的KPNA2基因作为大肠癌生物标记物的应用，能够有效指导大肠癌的临床分期，也能够准确地判断大肠癌患者的预后。本发明提供的能够抑制KPNA2基因表达的siRNA，能够有效地抑制大肠癌细胞的增值和迁移。本发明还提供了上述siRNA在制备KPNA2基因沉默型大肠癌细胞系的应用，该细胞系可用于探究KPNA2与大肠癌的相关性及其机理，为深入研究KPNA2与大肠癌发生、发展的可能机制提供一种可靠的研究基础，从而给大肠癌的靶向治疗提供有效的治疗靶点。

技术领域

本发明涉及医药基因工程技术领域，尤其是涉及一种KPNA2基因的应用和抑制KPNA2基因表达的siRNA的应用。

背景技术

大肠癌作为四方国家发病率排第三位的恶性肿瘤。每年的发病人数约有120万，其中位诊断年龄为70岁，但流行病学统计其发病具有年轻化倾向。在一些西方国家大肠癌的发病率呈现下降趋势，但是在一些国家尤其是发展中国家，大肠癌的发病率仍呈现明显升高趋势。随着我国经济的发展，国民生活方式和饮食结构的改变，大肠癌的发病率在我国呈现出逐年增高的趋势。大肠癌患者的预后与肿瘤分期相关，诊断时所处的分期越早，预后越好。因此，准确的病理分期对治疗方案的制定有着非常重要的意义。在临床实践中，治疗方案的制定和对大肠癌患者预后的判断依靠国际防癌联盟(International Union AgainstCancer，UICC)制定的TNM分期。其中包括原发灶的侵及深度(T分期)，淋巴结(N分期)及远隔脏器(M分期) 转移和肿瘤分化程度。除此之外还包括了一些肿瘤其他的相关因素，包括肿瘤是否穿透肠管侵犯其他组织，检出的淋巴结数目，肿瘤细胞的分化，神经浸润，微淋巴管和血管的癌栓等。即使有以上的危险因素作为TNM分期的补充，在临床实践中有时候却不能准确评估患者术前分期，仍然会经常出现过度治疗甚至治疗不足的现象，从而造成治疗失败。目前尚没有有效的生物标记物来指导大肠癌的临床分期。因此需要寻找新的生物标记物来提高临床分期的准确性迫在眉睫。

随着对抑癌基因和癌基因的定位和功能的研究深入，针对靶基因的治疗已经逐渐成为可能。因此，核胞浆转运蛋白作为存在于细胞质和细胞核之间双向转运蛋白越来越受到关注。核胞浆转运蛋白α2(Karyopherin-a2， KPNA2)作为核胞浆转运蛋白α家族的七个成员之一，由529个氨基酸组成，大小为58KDa。其结构在九十年代中期被确定。KPNA2由亲水性的输入蛋白β结合区域的N末端，无功能的短酸性C-羧基末端和10个重复穿膜结构的中心疏水区组成，这个区域与目标蛋白的核定位信号相结合。输入蛋白β结合区域已经被证明存在自身抑制功能，从而确保KPNA2只有与输入蛋白β结合的时候才会发生移位从而进行物质的核胞浆转运。自从Dahl 发现KPNA2在乳腺癌中的预后价值以来，KPNA2在恶性肿瘤中过表达逐渐引起肿瘤学家的关注。已经证明KPNA2表达增高的肿瘤包括黑色素瘤、卵巢癌、食管癌、肺癌、宫颈癌、前列腺癌、脑癌、肝癌和膀胱癌。同时，有研究发现KPNA2的表达和肿瘤分期之间同样存在着关联，一部分研究证明了随着肿瘤的进展KPNA2的表达也随之增加。除了对肿瘤相关蛋白有相互作用之外，KPNA2还通过其他一些途径参与肿瘤的形成和发展过程。虽然这些途径并不是肿瘤发生的直接原因，但也可以影响到致癌作用。比如激活异常的分化途径，病毒诱导的癌基因和调节免疫功能。

然而，目前国内外尚无关于大肠癌和KPNA2基因表达相关性的文献报道。

因此，探究KPNA2基因作为生物标记物与大肠癌之间的相关性日益成为研究的热点。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种KPNA2基因作为大肠癌生物标记物的应用。

本发明的第二个目的在于提供一种KPNA2基因在制备用于大肠癌筛检试剂中的应用。

本发明的第三个目的在于提供一种抑制KPNA2基因的表达在抑制大肠癌细胞的增殖和迁移中的应用。