[发明专利]鲟鱼骨中提取硫酸软骨素的方法

权利要求书

1.鲟鱼骨中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于包括以下步骤：

1)鲟鱼骨的预处理：以鲟鱼骨切片为原料，放入水浴锅中翻煮，去除肌肉、残余组织，捞起用NaOH溶液浸泡然后洗至中性，接着用异丙醇溶液浸泡然后洗净，粉碎、干燥备用；

2)碱解：将预处理的粉料鲟鱼骨加入NaOH溶液，在20～50℃下反应2～3h得鲟鱼骨的碱解液；

3)盐处理：将鲟鱼骨碱解液中加入NaCl，在30～50℃下间歇搅拌2～3h得鲟鱼骨的盐解液；

4)双酶水解：所得盐解液调节pH值至8，加入胰蛋白酶与木瓜蛋白酶组成的双酶进行酶解，酶解完成后在沸水中灭活，离心分离取上清液；

5)三氯乙酸沉降蛋白：向上清液中加入三氯乙酸，混匀后低温静置，离心收集上清液，调节pH至7.5～8.0；

6)活性炭脱色：加入活性炭于吸附，抽滤，取滤液；

7)乙醇沉淀：将滤液中加入无水乙醇，有沉淀产生，低温静置，除去上层液，取沉淀；

8)透析、冷冻干燥：将沉淀溶蒸馏水中，透析，冷冻干燥得硫酸软骨素产品。

2.如权利要求1所述鲟鱼骨中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤1中用20倍量(v/w)0.1mol/L的NaOH溶液浸泡2h；用20倍量(v/w)10wt％的异丙醇溶液浸泡2h。

3.如权利要求1所述鲟鱼骨中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤2中NaOH溶液浓度为5wt％，料液比为1:6；35℃下反应2.5h得鲟鱼骨的碱解液。

4.如权利要求1所述鲟鱼骨中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤3中NaCl溶液浓度为6wt％，40℃下反应2.5h得鲟鱼骨的盐解液。

5.如权利要求1所述鲟鱼骨中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤4中酶解温度为40℃，酶解时间为2h，酶量为3wt％。

6.如权利要求1所述鲟鱼骨中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤5中加入60wt％的三氯乙酸；4℃条件下静置4h。

7.如权利要求1所述鲟鱼骨中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤6中加入1％(w/v)的活性炭于50℃条件下吸附30min。

8.如权利要求1所述鲟鱼骨中提取硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤7中乙醇最终的体积分数为70％。