[发明专利]一种人类免疫缺陷病毒1型恒温检测试剂盒

权利要求书

1.一种人类免疫缺陷病毒1型恒温检测试剂盒，包括反应液、启动液、反应酶系、阴性质控品和阳性质控品，其特征在于：所述的反应酶系的成分包括单链结合蛋白、重组酶、HIV特异性引物（正向引物和反向引物）和荧光探针等，其中，重组酶为不依赖于能量分子的重组酶。

2.根据权利要求1所述的人类免疫缺陷病毒1型恒温检测试剂盒，其特征在于：其反应液成分包括：

Tris-缓冲液10mM--150mM

硫酸铵 0mM--150mM

二硫苏糖醇 0mM--10mM

甜菜碱 0M-2M

Tween200%-1%（质量百分比）

PEG1%--20%（质量百分比）

BSA0mg/mL--1mg/mL。

3.根据权利要求2所述的人类免疫缺陷病毒1型恒温检测试剂盒，其特征在于：Tris-缓冲液可选自Tris-H₂SO₄、Tris-乙酸、Tris-HCl中的任意一种或多种，Tris-缓冲液的pH为7.0～9.0。

4.根据权利要求1所述的人类免疫缺陷病毒1型恒温检测试剂盒，其特征在于：其启动液成分包括：

Mg²⁺ 5mM--20mM。

5.根据权利要求4所述的人类免疫缺陷病毒1型恒温检测试剂盒，其特征在于：Mg²⁺来自于硫酸镁、乙酸镁、氯化镁中的任意一种或多种。

6.根据权利要求1所述的人类免疫缺陷病毒1型恒温检测试剂盒，其特征在于：其反应酶系（干粉反应管）成分包括：

dNTPs 200uM-500uM

聚合酶Bsu 10-100U

单链结合蛋白1-10ug

重组酶（E.coli RecT） 1-10ug

逆转录酶10-100U

正向引物10-40pM

反向引物10-40pM

荧光探针10-30pM。

7.根据权利要求1或6所述的人类免疫缺陷病毒1型恒温检测试剂盒，其特征在于：正向引物的序列为CCCTCAGATGCTGCATATAAGCAGCTGCTTT；反向引物的序列为CCCTGTTCGGGCGCCACTGCTAGAGATTTT，荧光探针的序列为FAM-CACTG-dR-[T(BHQ-1)]TTAAGCCTCAATAAAGCTTGCCTTGAGTG-SpacerC3，其中荧光探针的标记方式为：5’端标记FAM，3’端标记SpacerC3，第5个碱基标记BHQ-1。

8.根据权利要求7所述的人类免疫缺陷病毒1型恒温检测试剂盒，其特征在于：荧光探针5’端标记的FAM荧光基团可被常用的其他荧光基团（如HEX、VIC、CY5等）替换。

9.根据权利要求1或6所述的人类免疫缺陷病毒1型恒温检测试剂盒，其特征在于：重组酶选自E.coli RecT蛋白；λ噬菌体β蛋白；啤酒酵母SepΙ/STPβ；啤酒酵母DPA蛋白；啤酒酵母STPα蛋白；粟酒裂殖酵母p¹⁴⁰/Exoǁ蛋白以及RrpΙ、HPP-Ι、v-SEP、ICP8蛋白。

10.一种人类免疫缺陷病毒1型恒温检测试剂盒，包括将反应液、反应酶系与启动液混合，加入待检样本，在荧光定量PCR仪上进行恒温扩增，得到检测结果，其特征在于：恒温扩增的温度为35～42℃。