[发明专利]一种用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜及其制备方法和应用在审
申请号: | 201710316358.9 | 申请日: | 2017-05-08 |
公开(公告)号: | CN107059407A | 公开(公告)日: | 2017-08-18 |
发明(设计)人: | 朱晓玥;徐刚伟;尹迪;王梦媛;沈明武;史向阳 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
主分类号: | D06M15/61 | 分类号: | D06M15/61;D06M13/432;D06M13/402;B01L3/00;G01N21/33;D04H1/55;D04H1/728;D01D5/00;D06M101/32 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所31233 | 代理人: | 黄志达,魏峯 |
地址: | 201620 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 捕获 叶酸 受体 表达 癌细胞 纳米 纤维 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜,其特征在于:所述纳米纤维膜为叶酸修饰的聚乳酸-羟基乙酸PLGA纳米纤维膜;其中,所述叶酸预先连接在多氨基化合物表面。
2.根据权利要求1所述的一种用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜,其特征在于:所述多氨基化合物为聚乙烯亚胺PEI。
3.根据权利要求1所述的一种用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜,其特征在于:所述修饰时采用EDC/NHS进行交联。
4.一种用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜的制备方法,包括:
(1)将聚乳酸-羟基乙酸PLGA溶于有机溶剂中,搅拌得到纺丝液;随后进行静电纺丝,干燥,得到PLGA纳米纤维膜;
(2)将叶酸溶于有机溶剂中,经EDC/NHS活化后和PEI反应2-3天,透析,冷冻干燥得到PEI-FA;其中,叶酸、EDC、NHS和PEI的质量比为4-8:20-50:10-20:200-500;
(3)采用EDC/NHS活化步骤(1)得到的PLGA纳米纤维膜,浸入超纯水中,随后加入PEI-FA的水溶液,反应2-3d后将纤维膜取出,浸入超纯水中清洗,干燥,即得用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜;其中,PLGA纳米纤维膜、EDC、NHS和PEI-FA的质量比为100:90-96:50-60:2-10。
5.根据权利要求4所述的一种用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中的有机溶剂为体积比3:1的四氢呋喃和N,N-二甲基甲酰胺的混合溶液;所述步骤(2)中的有机溶剂为二甲基亚砜DMSO。
6.根据权利要求4所述的一种用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中的静电纺丝工艺参数为:温度20-35℃,电压为15-20kV,接收距离为15cm,流速为0.3mL/h,环境湿度为40-50%。
7.根据权利要求4所述的一种用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中的PEI使用异硫氰酸荧光素FITC进行标记。
8.根据权利要求4所述的一种用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中的PEI-FA的水溶液的浓度为1~2mg/mL。
9.一种如权利要求1所述的用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜的应用,其特征在于:所述纳米纤维膜结合微流控芯片进行叶酸受体高表达癌细胞的特异性捕获。
10.根据权利要求9所述的一种用于捕获叶酸受体高表达癌细胞的纳米纤维膜的应用,其特征在于:所述微流控芯片包括:由玻璃基底、盖层组成的细胞捕获通道,细胞捕获通道的一端为样品注入口,另一端为样品出口,盖层具有椭圆柱阵列,纳米纤维膜夹于玻璃基底和盖层中间形成三明治结构,通过外置夹板固定和密封通道。
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