[发明专利]一种椴树的组织培养基及其快速繁殖的方法有效
申请号: | 201710316354.0 | 申请日: | 2017-05-05 |
公开(公告)号: | CN107135945B | 公开(公告)日: | 2020-04-24 |
发明(设计)人: | 季翔;胡春宏;常苹;王晨;王婷婷 | 申请(专利权)人: | 江苏东郁园林科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;A01H4/00 |
代理公司: | 北京维正专利代理有限公司 11508 | 代理人: | 倪志华 |
地址: | 214000 江苏省无*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 椴树 组织 培养基 及其 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种椴树的组织培养基,包括诱导培养基、增殖培养基以及生根培养基,其特征在于:所述诱导培养基由如下组分组成:MS培养基:4630~4640mg,噻苯隆TDZ:0.001~0.010mg,赤霉素:2~3mg,琼脂:5~8g,蔗糖:25~40g,肌醇:90~110mg,加入水补足至1升,所述增殖培养基由如下组分组成:MS培养基:4630~4640mg,噻苯隆TDZ:0.001~0.010mg,赤霉素:2~3mg,琼脂:5~8g,蔗糖:25~40g,肌醇:90~110mg,加入水补足至1升,所述生根培养基由如下组分组成:MS培养基:2315~2320mg,吲哚丁酸IBA:1.0mg~2.0mg,萘乙酸NAA:1.0mg~2.0mg,琼脂:5~8g,蔗糖:10~20g,加入水补足至1升。
2.根据权利要求1所述的一种椴树的组织培养基,其特征在于:所述诱导培养基由如下组分组成:MS培养基:4636.43mg,噻苯隆TDZ:0.005mg,赤霉素:2.5mg,琼脂:6g,蔗糖:30g,肌醇:100mg,加入水补足至1升,所述增殖培养基由如下组分组成:MS培养基:4636.43mg,噻苯隆TDZ:0.005mg,赤霉素:2.0mg,琼脂:6g,蔗糖:30g,肌醇:100mg,加入水补足至1升,所述生根培养基由如下组分组成:2318.22mg,吲哚丁酸IBA:1.5mg,萘乙酸NAA:1.5mg,琼脂:6g,蔗糖:15g,加入水补足至1升。
3.一种椴树的快速繁殖方法,其特征在于:包括如下培养步骤:
S1:选用外植体,外植体选用健康椴树当年生枝条的芽体饱满的半木质化枝条茎尖部分;
S2:消毒及初代培养,将椴树外植体叶片剪去,清水冲洗干净,在工作台上把冲洗过的外植体放入浓度为75%的酒精中消毒30秒,再用无菌水冲洗3~4次,将外植体放置在消毒液中浸泡60分钟,完成消毒后,将外植体接种到根据权利要求1所述的诱导培养基内,在光照强度1500Lx条件下,温度16℃,暗光培养1周,后转温度23℃,光照时间16h,培养6周;所述消毒液包括如下组分:白猫漂白水1份及3份无菌水;
S3:继代培养:在所述诱导培养基内30~40天,外植体茎尖出现新梢时将外植体转接到根据权利要求1所述的增殖培养基内,在一定的培养环境下,每隔四周转接到新的增殖培养基内;
S4:生根培养:经过继代培养的椴树组培苗,外植体出现顶芽时,取2~3cm的顶芽,放入根据权利要求1所述的生根培养基,直至生根完成培养。
4.根据权利要求3所述的一种椴树的快速繁殖方法,其特征在于:所述步骤S3中培养环境为在光照强度1500Lx,温度为25℃,光照时间16小时,在黑暗条件,温度为23℃,放置时间8小时。
5.根据权利要求3所述的一种椴树的快速繁殖方法,其特征在于:所述培养基均经过灭菌处理,将配制好的培养基放置在灭菌锅内,在0.105MPa压力,温度为121℃的情况下,灭菌15~30min。
6.根据权利要求3所述的一种椴树的快速繁殖方法,其特征在于:所述培养基内还添加有抗氧化剂,所述抗氧化剂为半胱氨酸。
7.根据权利要求3所述的一种椴树的快速繁殖方法,其特征在于:所述培养基内还添加有0.1~0.5g的活性炭。
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