[发明专利]一种化合物用作抗体上糖基的封闭试剂的应用

说明书

本发明涉及到蛋白质糖基的检测，尤其涉及到一种化合物用作抗体上糖基的封闭试剂的应用。为了解决目前抗体本身的糖基对于检测的干扰的问题，本发明提供一种用作抗体上糖基的封闭试剂的化合物，所述化合物选自α‑氨基脲、乙酰肼、硫乙酰肼、氨基硫脲、天冬酰胺酰肼、酪氨酸肼、N(苄氧基羰基)‑L‑缬氨酰‑L‑酪氨酸酰肼、或N(苄氧基羰基)甘氨酸酰肼中的一种。用所述化合物对抗体进行预处理，可以避免植物凝集素结合到抗体上，从而使对于被捕获的蛋白上的糖基进行精确的定量，且封闭抗体的过程简单，为一步反应，缩短了现有封闭抗体的反应过程，且降低成本非常明显。

技术领域

本发明涉及到蛋白质糖基的检测，尤其涉及到一种化合物用作抗体上糖基的封闭试剂的应用。

背景技术

利用分子标志物对疾病进行早期诊断可显著降低疾病导致的死亡。蛋白的糖基化是最普遍的蛋白质翻译后修饰。这些修饰对蛋白质的物理、化学和生物性质都发挥重要作用；同时对各种生物过程，包括发育、细胞分化、受精、细胞免疫识别，宿主病原体相互作用，细胞间信号转导都发挥着非常重要的作用。由于糖基对于环境特别敏感。因此，检测异常糖基可以作为一种诊断疾病的一个特异的生物标志物，可以用于对于疾病的早期诊断。事实上，目前很多临床上常用的用于诊断的生物标志物就是蛋白质的糖基，比如CA19-9,CA125,和CA15-3等等。

检测蛋白质糖基的一个简单低成本的方式是用一种酶联免疫分析的方法进行：首先用抗体捕获特异性的蛋白，然后利用特异性的植物凝集素检测蛋白质上的糖基的变化。但是，由于抗体本身具有糖基，会对于检测结果有较大的干扰。

发明内容

为了解决目前抗体本身的糖基对于检测的干扰的问题，本发明提供一种化合物用作抗体上糖基的封闭试剂的应用，用此化合物对抗体进行预处理，这些化合物可以有效的和被高碘酸钠氧化的抗体上的糖基上的醛基反应，封闭糖基，避免植物凝集素结合到抗体上，从而使对于被捕获的蛋白上的糖基进行精确的定量。

为了解决上述技术问题，本发明采用下述技术方案：

本发明提供一种化合物的应用，所述化合物用作抗体的糖基的封闭试剂，所述化合物的通用结构式为：

其中，X选自O，N，或S；Y选自C，N，S，苄基环，氨基酸(谷氨酸除外)，或多肽的侧链基团。

进一步的，X选自O＝，NH＝，或S＝；Y选自－C≡，－N＝，－S－，苄基环，氨基酸(谷氨酸除外)，或多肽的侧链基团。

进一步的，Y选自CHR₂，CH₂R，CH₃，NHR，或NH₂。

进一步的，Y选自CH₃，或NH₂。

进一步的，X选自O，N，或S，其中吸电子能力从O，N，S，越来越弱，使酰肼基团与醛基的反应性越来越强。

进一步的，Y选自C，N，S，苄基环，氨基酸(谷氨酸除外)的侧链基团，或多肽的侧链基团，这些基团的推电子能力依次增强，使酰肼基团的反应能力也依次增强。

进一步的，所述X选自O、或S，Y选自甲基、氨基、或氨基酸的侧链基团。

所述的化合物选自α-氨基脲、乙酰肼、硫乙酰肼、氨基硫脲、天冬酰胺酰肼、酪氨酸肼、N(苄氧基羰基)-L-缬氨酰-L-酪氨酸酰肼、或N(苄氧基羰基)甘氨酸酰肼中的一种。

进一步的，所述化合物的化学结构式如下：

(a)α-氨基脲；(b)乙酰肼；(c)硫乙酰肼；(d)氨基硫脲；(e)天冬酰胺酰肼；(f)酪氨酸肼；(g)N(苄氧基羰基)-L-缬氨酰-L-酪氨酸酰肼；(h)N(苄氧基羰基)甘氨酸酰肼。