[发明专利]茶叶成分在抑制炎症方面的应用

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及基于茶叶成分抑制炎症的方法。

背景技术

巴豆油所致耳肿胀模型是一种常用的炎症模型，多用于抗炎药物的研究，其中主要致炎成分是佛波酯(TPA)。TPA可致病理和生物化学变化，包括血管通透性的改变，炎症细胞的聚集，巨噬细胞的激活，炎症介质的释放增加，以及促进炎症细胞DNA、RNA的合成。

在现有技术中，陆彩鹏等(华西药学杂志，2014,29(5)：609-610)研究表明，亚油酸及其甲酯能有效抑制巴豆油所致小鼠耳肿胀，具有一定抗炎作用；陈一村等(汕头大学医学院学报，2010,23(1):7-9)研究表明，海滩牵牛有效部位具有较强的抗炎活性，对巴豆油所致小鼠耳肿胀有明显减轻作用。

目前，对巴豆油所致小鼠耳肿胀抑制效果的研究中，还未有关于茶氨酸抑制效果的研究，而茶氨酸在茶叶中含量是其干重的1%-2%，游离氨基酸的40%-70%，并且具有一些特殊的生理功能，如镇静和舒缓神经、增强学习和记忆、降血压、抗肿瘤、抗疲劳、提高人体免疫力等功能，使其成为茶叶功能成分研究与利用的又一大热点。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题与不足，本发明提供了一种利用茶叶中茶氨酸(THN)对TPA诱导的小鼠耳肿胀炎症的抑制方法。

为实现上述目的，本发明所才有的技术方案如下：

基于茶叶成分抑制炎症的方法，所述方法如下：

向带有炎症的哺乳动物受试者给予有效量的茶氨酸，并涂抹于患处。

特别地，所述茶氨酸为单体，可于市面直接购买，或从茶叶中提取分离。

特别地，所述受试者为4-6周龄雌性ICR小鼠。

特别地，茶氨酸，作为治疗或抑制炎症的药剂。

特别地，茶氨酸，在治疗或抑制因TPA诱导的哺乳动物耳肿胀炎症方面的应用。

本发明要解决的第二个问题是：茶氨酸抑制因TPA诱导的哺乳动物耳肿胀炎症的机理。通过Western blot法检测小鼠耳片中COX2蛋白表达量的变化，以及免疫荧光法检测炎症因子IL-1β和TNF-α，结果表明，茶氨酸THN是通过调控COX2蛋白表达，抑制炎症因子IL-1β和TNF-α的表达而抑制TPA诱导的耳肿胀炎症。

本发明与现有技术相比，提供了一种新的抑制炎症的方法和研究理论，通过对动物进行试验，显示本方法具有显著的抗炎效果；此外，利用从茶叶中提取茶氨酸进行研究与开发，对于茶叶功能更进一步深入研究具有重要意义和价值。

附图说明

图1为小鼠耳片处理前后，耳片肿胀程度随时间的变化趋势。

图2为小鼠耳片处理前后，两耳片的厚度和重量差值。

图3为小鼠耳片处理前后耳片外观图。

图4为小鼠耳片病理结构的HE染色图。

图5为小鼠耳片中COX2蛋白表达量。

图6为小鼠耳片IL-1β(上)和TNF-α(下)炎症因子表达水平。

具体实施例

以下实施例为本发明的一些举例，不应视为是对本发明的限定。

将4周龄的雌性ICR小鼠在动物房饲养稳定2周后，60只小鼠随机分成6组，每组10只，分别为：空白组（丙酮水溶液），TPA模型组（TPA+丙酮水溶液），阳性对照组（TPA+地塞米松+丙酮水溶液），低/中/高剂量实验组（TPA+茶氨酸+丙酮水溶液）。

小鼠右耳朵内外两侧分别涂上20μL 50%丙酮溶液或不同浓度茶氨酸+50%丙酮溶液20μL，20 min后再涂上20μL TPA丙酮溶液（2.5μg/20μl），6 h后将小鼠处死，拍摄两耳红肿程度，游标卡尺测量两耳厚度，两耳打孔，孔径为6 mm，取耳片组织并称重。每组随机选4只小鼠右耳片组织浸泡于福尔马林溶液中固定，按常规石蜡包埋、切片、HE 染色后于显微镜上观察拍片。每组剩下6只小鼠右耳片组织储存在-80℃作Elisa或Western blot分析。

实施例1

基于茶叶成分抑制炎症的方法，步骤如下：

向ICR小鼠右耳朵内外两侧涂上2.5μgTPA+茶氨酸+20μL 50%丙酮水溶液。

特别地，所述茶氨酸为单体，可于市面直接购买。

实施例2 不同浓度茶氨酸对炎症抑制作用影响