[发明专利]一种特异性检测人类微小病毒B19核酸的荧光PCR方法和试剂盒在审
| 申请号： | 201710308465.7 | 申请日： | 2017-05-04 |
| 公开（公告）号： | CN107058629A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 方园;余圣良;周健 | 申请（专利权）人： | 张家港蓝苏生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司32103 | 代理人： | 汪青,周敏 |
| 地址： | 215600 江苏省苏州市张家港*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 特异性 检测 人类 微小 病毒 b19 核酸 荧光 pcr 方法 试剂盒 | ||
1.一种特异性检测人类微小病毒B19核酸的荧光PCR试剂盒，包括特异性引物对和探针，其特征在于：
所述的特异性引物对为：
正向引物：5’-GCCGTGTGCACCCATTGTA-3’；
反向引物：5’-GGGCGTTTAGTTACGCATCCT-3’；
所述的探针为：5’-ACTCCCCACCGTGCCCTCAGC-3’。
2.根据权利要求1所述的特异性检测人类微小病毒B19核酸的荧光PCR试剂盒，其特征在于：所述的探针的5’端标记报告荧光素或荧光染料，3’端标记淬灭基团。
3.根据权利要求2所述的特异性检测人类微小病毒B19核酸的荧光PCR试剂盒，其特征在于：所述的报告荧光素或荧光染料为FAM或其它任何可以作为探针标记的荧光素或荧光染料；所述的淬灭基团为TAMRA或其它任何可以作为淬灭基团的化学物质。
4.根据权利要求1所述的特异性检测人类微小病毒B19核酸的荧光PCR试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒还包括PCR反应液、阳性质控品和阴性质控品。
5.根据权利要求4所述的特异性检测人类微小病毒B19核酸的荧光PCR试剂盒，其特征在于：所述的阳性质控品含人工合成序列，所述的人工合成序列为人工合成含所述B19病毒特异性引物对扩增产物片段的序列。
6. 根据权利要求5所述的特异性检测人类微小病毒B19核酸的荧光PCR试剂盒，其特征在于：所述阳性质控品所含的人工合成序列为：
GGTCATTTACCATATGTACTATATGACCCTACAGCTACAGATGCAAAACAA
CACCACAGACATGGATATGAAAAGCCTGAAGAATTGTGGACAGCCAAAAGC
CGTGTGCACCCATTGTAAACACTCCCCACCGTGCCCTCAGCCAGGATGCGT
AACTAAACGCCCACCAGTACCACCCAGACTGTACCTGCCCCCTCCTATACC
TATAAGACAGCCTAACACAAAAGATATAGACAATGTAGAATTTAAGTATTT
AACCAGATATGAACAACATGTTATTAGAATGTTAAGATTGTGTAAT。
7.根据权利要求4所述的特异性检测人类微小病毒B19核酸的荧光PCR试剂盒，其特征在于：所述阴性质控品含有人工合成的人类管家基因GAPDH部分片段的特异性序列。
8.根据权利要求7所述的特异性检测人类微小病毒B19核酸的荧光PCR试剂盒，其特征在于：用于扩增所述的人工合成人类管家基因GAPDH部分片段的引物对如下：
正向引物：5’-ATGAATGGGCAGCCGTTAG-3’；
反向引物：5’-CTCAAAGGGCAGGAGTAAAGG-3’。
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