[发明专利]一种防治线虫的复合微生物可湿性粉剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物制剂及其制备方法，具体涉及一种具防治线虫的复合微生物可湿性粉剂及其制备方法，属于农业微生物技术领域。

背景技术

近年来，由于连作面积的不断扩大，以及不科学用药，致使线虫发展蔓延速度较快，抗性增强，作物死苗率不断增加，从而造成了作物严重减产，甚至绝产，品质降低，已经严重影响了农作物生产。

市场上存在多种防治线虫的菌剂，但是由于菌种单一、助剂不亲和等原因，造成了运输、储存困难，存在货架期短等弊端。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种防治线虫的复合微生物可湿性粉剂及其制备方法。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种防治线虫的复合微生物可湿性粉剂，由有效成分和助剂组成，其特征在于，

前述有效成分为：由保藏编号为CGMCC No.13761的淡紫拟青霉发酵得到的淡紫拟青霉粉剂和由保藏编号为CGMCC No.13763的草酸青霉发酵得到的草酸青霉粉剂；

前述助剂为：高岭土、扩散剂NNO和木质素磺酸钠。

前述的防治线虫的复合微生物可湿性粉剂，其特征在于，前述淡紫拟青霉粉剂的孢子含量≥120亿/克，前述草酸青霉粉剂的孢子含量≥120亿/克。

前述的防治线虫的复合微生物可湿性粉剂，其特征在于，以质量百分比计，各组分的含量如下：

前述的防治线虫的复合微生物可湿性粉剂，其特征在于，制备方法如下：

Step1：将保藏编号为CGMCC No.13761的淡紫拟青霉和保藏编号为CGMCC No.13763的草酸青霉分别接种在PDA平板培养基上，27℃暗培养7d，将培养好的平板作为原种；

Step2：将Step1培养好的原种分别接种在PDA液体培养基上，27℃、121rpm暗培养4d，将发酵好的液体作为种子液；

Step3：将麦麸加水控制湿度在20％，121℃灭菌30min，作为发酵培养基；

Step4：将Step2培养好的种子液分别加入到Step3制得的发酵培养基中，27℃静置暗培养14d；

Step5：将Step4制得的发酵液分别烘干，粉碎，过100目筛子，得到孢子含量≥120亿/克的淡紫拟青霉粉剂和孢子含量≥120亿/克的草酸青霉粉剂；

Step6：将Step5制得的淡紫拟青霉粉剂、草酸青霉粉剂与高岭土、扩散剂NNO和木质素磺酸钠混合均匀，即得。

本发明的有益之处在于：

(1)本发明的复合微生物可湿性粉剂，同时含有淡紫拟青霉和草酸青霉，两种菌剂作用互补，能够有效防治线虫；选用高岭土、扩散剂NNO和木质素磺酸钠作为助剂，亲和性好，保证了孢子的存活性和稳定性，延长了保存时间，进而减少了运输和储藏成本；

(2)本发明的复合微生物可湿性粉剂，淡紫拟青霉可以寄生线虫卵，分泌次生代谢产物抑制线虫生长，草酸青霉在防治线虫的同时还可以防治土传病害；

(3)本发明的复合微生物可湿性粉剂，草酸青霉具有解磷解钾的作用，可以促进植物生长。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作具体的介绍。

第一部分：制备淡紫拟青霉粉剂

1、筛选分离菌株

将山东寿光大棚采集的土壤稀释10^-5，均匀涂布在含有氨苄抗生素的PDA培养基上分离培养，挑选真菌单菌落。

2、鉴定菌株

利用ITS序列进行分子鉴定，选择淡紫拟青霉菌株。

3、菌株保藏

我们将筛选分离得到的淡紫拟青霉于2017年03月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为CGMCC No.13761。

4、培养原种

将保藏编号为CGMCC No.13761的淡紫拟青霉接种在PDA平板培养基上，27℃暗培养7d，将培养好的平板作为原种。

5、培养种子液

将前面培养好的原种接种在PDA液体培养基上，27℃、121rpm暗培养4d，将发酵好的液体作为种子液。

6、制作发酵培养基

将麦麸加水控制湿度在20％，121℃灭菌30min，作为发酵培养基，待用。

7、发酵

将前面培养好的种子液加入到前面制得的麦麸发酵培养基中，27℃静置暗培养14d。

8、制成粉剂