[发明专利]一种用于检测手足口病相关病原体的LAMP引物组合物及其相关应用有效
| 申请号: | 201710305674.6 | 申请日: | 2017-05-03 |
| 公开(公告)号: | CN107058628B | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
| 发明(设计)人: | 方雪恩;李杨;严俊;闵建峰;孔继烈 | 申请(专利权)人: | 上海速创诊断产品有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司: | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人: | 竺路玲 |
| 地址: | 200120 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 检测 手足 相关 病原体 lamp 引物 组合 及其 应用 | ||
1.一种用于检测手足口病相关病原体的LAMP引物组合物,其特征在于,包括肠道病毒EV通用型引物组、肠道病毒EV71型引物组、肠道病毒CA16型引物组、肠道病毒CA10型引物组和肠道病毒CA6型引物组;
其中:所述肠道病毒EV通用型引物组正向外引物F3序列如SEQ ID NO. 5所示,反向外引物B3序列如SEQ ID NO. 6所示,正向内引物FIP序列如SEQ ID NO. 7所示,反向内引物BIP序列如SEQ ID NO. 8所示;
所述肠道病毒EV71型引物组正向外引物F3序列如SEQ ID NO. 9所示,反向外引物B3序列如SEQ ID NO. 10所示,正向内引物FIP序列如SEQ ID NO. 11所示,反向内引物BIP序列如SEQ ID NO. 12所示;
所述肠道病毒CA16型引物组正向外引物F3序列如SEQ ID NO. 13所示,反向外引物B3序列如SEQ ID NO. 14所示,正向内引物FIP序列如SEQ ID NO. 15所示,反向内引物BIP序列如SEQ ID NO. 16所示;
所述肠道病毒CA10型引物组正向外引物F3序列如SEQ ID NO. 17所示,反向外引物B3序列如SEQ ID NO. 18所示,正向内引物FIP序列如SEQ ID NO. 19所示,反向内引物BIP序列如SEQ ID NO. 20所示;
所述肠道病毒CA6型引物组正向外引物F3序列如SEQ ID NO. 21所示,反向外引物B3序列如SEQ ID NO. 22所示,正向内引物FIP序列如SEQ ID NO. 23所示,反向内引物BIP序列如SEQ ID NO. 24所示;
所述LAMP引物组合物还包括内参引物组,所述内参引物组正向外引物F3序列如SEQ IDNO. 1所示,反向外引物B3序列如SEQ ID NO. 2所示,正向内引物FIP序列如SEQ ID NO. 3所示,反向内引物BIP序列如SEQ ID NO. 4所示。
2.如权利要求1所述的LAMP引物组合物在制备检测手足口病相关病原体的试剂或试剂盒的相关应用。
3.一种检测手足口病相关病原体的芯片,其特征在于,所述芯片固定有如权利要求1所述的LAMP引物组合物。
4.根据权利要求3所述的一种检测手足口病相关病原体的芯片,其特征在于,所述芯片为恒温扩增微流控芯片。
5.一种用于检测手足口病相关病原体的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括如权利要求1所述的LAMP引物组合物。
6.根据权利要求5所述的一种用于检测手足口病相关病原体的试剂盒,其特征在于,还包括Bst DNA聚合酶、显色染料。
7.根据权利要求6所述的一种用于检测手足口病相关病原体的试剂盒,其特征在于,所述显色染料选自HNB、Calcein、甲酚红、酚红、间甲酚紫、溴甲酚紫、中性红、萘酚酞、百里酚蓝任意一种或几种。
8.根据权利要求7所述的一种用于检测手足口病相关病原体的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒对病原体核酸的最低检测限均为102TU/mL。
9.一种非诊断和治疗目的的检测手足口病相关病原体的方法,其特征在于,包括步骤:
提取待测样本的核酸,用如权利要求1所述的LAMP引物组合物进行环介导等温扩增,检测扩增产物,确定待测样本是否含有相应引物组对应的手足口病相关病原体;
或
提取待测手足口病相关病原体的核酸,用如权利要求1所述的LAMP引物组合物进行环介导等温扩增,检测扩增产物,确定待测手足口病相关病原体是否为相应引物组对应的手足口病相关病原体。
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