[发明专利]一种磁性双功能纳米探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种磁性双功能纳米探针，其特征在于，所述探针以羧基化Fe₃O₄磁性纳米粒子作为纳米载体，同时固定萘啶衍生物和二茂铁衍生物；同时具有两种作用：一是表面的修饰的二茂铁提供电信号；二是表面修饰的萘啶衍生物具有识别核酸序列的功能；

所述磁性双功能纳米探针，按照以下方法制备：

将羧基化Fe₃O₄磁性纳米粒子表面的羧基通过1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺进行活化，把羧基化Fe₃O₄磁性纳米粒子粗品分散在50mL超纯水中，取出20μL上述制备好的悬浮液加入到2mL MES缓冲溶液中，再同时加入76mg 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和46mg N-羟基琥珀酰亚胺，在37℃下超声反应40min，将反应后的溶液进行磁分离，用超纯水洗涤3次，即得到羧基化Fe₃O₄磁性纳米粒子表面羧基的活化产物；

将上面制备的活化产物重新分散到2mL PBS缓冲溶液，同时加入80μL浓度为1mM的萘啶衍生物溶液和100μL浓度为1mM的二茂铁衍生物溶液，在25～37℃下超声反应1～1.5h，将反应得到的溶液进行磁分离，用PBS缓冲溶液洗涤3次，之后分散到一定量的PBS缓冲溶液中，得到所述的双功能纳米探针。

2.一种制备权利要求1所述磁性双功能纳米探针的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

将羧基化Fe₃O₄磁性纳米粒子表面的羧基通过1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺进行活化，把羧基化Fe₃O₄磁性纳米粒子粗品分散在50mL超纯水中，取出20μL上述制备好的悬浮液加入到2mL MES缓冲溶液中，再同时加入76mg 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和46mg N-羟基琥珀酰亚胺，在37℃下超声反应40min，将反应后的溶液进行磁分离，用超纯水洗涤3次，即得到羧基化Fe₃O₄磁性纳米粒子表面羧基的活化产物；

将上面制备的活化产物重新分散到2mL PBS缓冲溶液，同时加入80μL浓度为1mM的萘啶衍生物溶液和100μL浓度为1mM的二茂铁衍生物溶液，在25～37℃下超声反应1～1.5h，将反应得到的溶液进行磁分离，用PBS缓冲溶液洗涤3次，之后分散到一定量的PBS缓冲溶液中，得到所述的双功能纳米探针。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述二茂铁衍生物的制备包括以下步骤：

a)将二茂铁甲酸在苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐HBTU和N,N-二异丙基乙胺DIPEA作用下，与N-Boc-乙二胺反应得到二茂铁衍生物Boc-AFFA；

b)将二茂铁衍生物Boc-AFFA在4M盐酸乙酸乙酯溶液中脱保护得二茂铁衍生物AFFA。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述MES缓冲溶液为0.1M，pH＝6.0并含有0.5M NaCl的吗啉乙磺酸缓冲溶液。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述PBS缓冲溶液为10mM，pH＝7.4的磷酸盐缓冲溶液。

6.如权利要求1所述的磁性双功能纳米探针或者按照权利要求2-5任意一项所述的制备方法所制备的磁性双功能纳米探针用于选择性的识别CGG三核苷酸重复序列方面的用途。